南美白对虾发生脱壳不遂症的原因与防治方法主要有以下几种。
1对虾感染慢性疾病,进食减少,体质衰弱,脱壳时体力衰竭,导致死亡。
解决方案:在饲料中添加脱壳素、维生素C和免疫多糖。
2水质不良,底质恶化,池水长期处于低溶氧状况下,或夜间溶解氧偏低,水底有害物质含量过高,对虾处于高度应激状态,无力脱壳。
解决方案:加强换水,换水后用超级底净、活性黑土处理水质和底质,2天后施用益水宝或绿水利生素,维持良好的水质和底质。
3饲料缺钙或虾体钙代谢出现障碍,造成脱壳困难。
解决方案:在饲料中添加利胃宝,适当投喂鲜活饲料,同时加强换水,增强南美白对虾对钙磷的吸收能力。
白对虾腹部发白可能是病菌感染。用蛭弧菌应该对你用帮助。
噬菌蛭弧菌与解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等分泌抗菌肽、依枯草菌素等抑菌物质的生防细菌不同,它主要以机械钻孔与酶解的方式破坏病原菌细胞壁,从而达到杀菌的效果。噬菌蛭弧菌的这种作用方式也决定了其杀菌范围比
蛭弧菌杀菌原理
噬菌蛭弧菌作为一种具有先天独特噬菌特性的寄生性细菌,在虾蟹病害防治中逐渐崭露头角,已经成为虾蟹健康养殖的“新秀”。
我国是水产养殖大国,多年来虾蟹产量居世界之首。然而,随着虾蟹养殖业的迅速发展,水质污染越来越严重,导致虾蟹发病与死亡的损失也愈加触目惊心,水质污染与病害发生已经成为制约虾蟹健康养殖可持续发展的瓶颈。据研究与调查统计表明,水质污染已经对虾蟹生长、发育、繁殖及其产量与产品品质产生了重要的不良影响,还导致了生物多样性的降低;我国虾蟹每月平均发病率和死亡率分别约高达1403%-2393%和392%-2379%,由此造成的直接经济损失高达4950亿元。因此,如何进行有效的养殖水体水质与病害控制无疑是虾蟹健康养殖业可持续发展所面临的巨大挑战。
目前,利用微生物进行水质处理与病害防治业已证明是一种绿色环保、有效的病害防治技术与方法,在国内外均有较多的报道。其中噬菌蛭弧菌作为一种具有先天独特噬菌特性的寄生性细菌,在虾蟹病害防治中逐渐崭露头角,已经成为虾蟹健康养殖的“新秀”。
本文从噬菌蛭弧菌的噬菌机理入手,进一步阐明了噬菌蛭弧菌作为一种新型生防菌剂所具有的独特功效,以期加深我国虾蟹养殖者对噬菌蛭弧菌的认识,加快噬菌蛭弧菌制剂在我国虾蟹健康养殖应用中的推广进程。
一、噬菌蛭弧菌是一种具有先天独特噬菌特性的猎食性细菌 自德国学者Stolp和Petzold(1962年)首次在德国的土壤中发现了这种以寄生和裂解细菌为生的噬菌蛭弧菌以来,国内外学者相继对其噬菌机理展开了研究。迄今已经证实,噬菌蛭弧菌对病原菌的作用方式为“穿入、稳定、裂解”模型,即噬菌蛭弧菌首先通过化学趋避性识别并吸附宿主细菌,然后通过酶解和机械钻孔等一系列反应,进入宿主细菌的质壁空间或细胞质,对宿主细胞进行一系列的修饰与改造,同时进行自身生物大分子合成,最终分裂形成子代蛭弧菌并释放到宿主细胞外。
近年来,为了在基因与蛋白质水平深入探索噬菌蛭弧菌的噬菌机理,Beck、Barel等学者(2005)研究了噬菌蛭弧菌在宿主体内增殖时产生的蛋白与一些潜在的功能基因,发现外膜蛋白、蛋白酶基因很可能在其识别和裂解宿主菌的过程中起了非常重要的作用。这些研究为进一步阐明噬菌蛭弧菌的噬菌机理奠定了坚实的基础。
二、噬菌蛭弧菌在虾蟹健康养殖应用中的独特功效
1、噬菌蛭弧菌对虾蟹病原菌的杀菌范围广,噬菌效果显著 噬菌蛭弧菌与解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等分泌抗菌肽、依枯草菌素等抑菌物质的生防细菌不同,它主要以机械钻孔与酶解的方式破坏病原菌细胞壁,从而达到杀菌的效果。噬菌蛭弧菌的这种作用方式也决定了其杀菌范围比其他生防细菌更为广泛。
大量研究结果表明,噬菌蛭弧菌几乎能够裂解虾蟹常见的病原菌种类。噬菌蛭弧菌对虾蟹病原菌的寄生作用后表明,噬菌蛭弧菌对非01霍乱弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、梅氏弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、气单胞菌等共25株虾蟹常见病原菌具有良好的噬菌活性。因此,通过向水体中泼洒噬菌蛭弧菌,可以广泛降低水体中虾蟹病原菌的种类与数量,从而减少了虾蟹细菌性病害的发生率。
此外,噬菌蛭弧菌对病原菌的噬菌效果也极为显著。试验证实噬菌蛭弧菌能够在5天使嗜水气单胞菌含量下降103cfu/mL,在9天使嗜水气单胞菌含量下降107cfu/mL。这些研究表明噬菌蛭弧菌消除致病菌的效率高,为进一步在虾蟹细菌性病害防治上推广应用提供了重要的临床试验依据。
2、噬菌蛭弧菌噬菌条件较为宽松,适应虾蟹养殖水体环境能力强虾蟹养殖生长的pH、温度范围与噬菌蛭弧菌的噬菌条件基本相同。据研究表明,目前分离的噬菌蛭弧菌菌株对pH、温度等环境因子的要求并不严格,其噬菌条件范围一般为pH65-86和4℃-37℃。例如,邵桂元等(1995)研究发现,噬菌蛭弧菌在4℃-37℃和pH60-80条件下对点状产气单胞菌有形成噬菌斑的能力;李戈强等(1998)试验也证明噬菌蛭弧菌在温度10-35℃和pH65-86范围内对河流弧菌均有裂解作用,并进一步指出在25-30℃和65-81范围内噬菌蛭弧菌对河流弧菌裂解活性最强。而且,Rice等(1998)试验也证实,水体中的天然细菌含量完全可以保持噬菌蛭弧菌的生长。这些均说明噬菌蛭弧菌对虾蟹养殖水体环境的适应能力强,对温度和pH的适应范围较宽松。
3、噬菌蛭弧菌能够解决虾蟹病原菌因出现耐药性所导致的负面效应
耐药性是指病原体在反复接触抗病原体药物后,其反应不断减弱,以至最后能够抵抗药物而不被杀灭或抑制的现象。耐药性的产生除了遗传因素外,主要与养殖过程中长期使用某种药物、用药方法不当以及病原体的异地传播有关。病原菌耐药性的产生,不仅会导致用药量增加,提高养殖成本,而且还会造成环境与水产品污染,进而危害人类健康。
研究表明,噬菌蛭弧菌是一种具有先天噬菌特性的寄生性细菌,其噬菌作用不因病原菌是否产生耐药性而发生影响。本实验室曾观察了噬菌蛭弧菌对耐沙拉沙星和新霉素的嗜水气单胞菌的裂解作用,发现其对这些嗜水气单胞菌耐药菌株仍然具有良好的噬菌效果。因此,噬菌蛭弧菌是解决病原菌不断产生耐药问题的最佳选择之一。
4、噬菌蛭弧菌具有水质改良、增强免疫力与抗病菌感染三重功效 噬菌蛭弧菌作为一种寄生性细菌,除了具有良好的噬菌效果外,经研究证实还具有水质改良、增强免疫力与抗病菌感染三重功效,这是任何一种益生菌与化学消毒剂所不能比拟的。张梁等(2005)研究了噬菌蛭弧菌对水质影响后发现,噬菌蛭弧菌能够显著改善养殖环境中的主要化学指标,具体表现在:向水中泼洒含量为5×104PFU/L的噬菌蛭弧菌制剂后,养殖水体的化学耗氧量、氨氮含量、硫化物含量分别下降了2995%、3387%和3438%,溶解氧含量上升了1243%;张吕平等(2009)研究进一步指出噬菌蛭弧菌(3×105PFU/mL)抑制弧菌的效果明显优于二氯异氰尿酸钠(03mg/L)和季铵盐络合碘(03 mg/L)。
此外,徐琴等(2007)研究表明,噬菌蛭弧菌能够明显促进中国对虾生长及非特异免疫因子活性的提高。将噬菌蛭弧菌以1%比例添加到中国对虾基础饲料中连续投喂25天后发现,对虾增长率、增重率、存活率分别提高了4907%、7461%、50%;溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力分别提高了约500%和100%,对虾抗鳗弧菌感染的相对保护率也高达529%。这些研究结果均显示了噬菌蛭弧菌在预防虾蟹病菌感染方面的优越性。
三、噬菌蛭弧菌在虾蟹健康养殖应用中的实际案例
案例一:浙江萧山南美白对虾黄腿病
图1 黄腿
1、基本情况 广东湛江佳鱼水产养殖有限公司,在湛江市虾塘600亩(放苗7-8万尾/亩),且自有虾苗淡化场。2016年8月,4个虾塘开始偷死,原因不详。后通过对养殖水样的分析检测、细菌的分离培养鉴定,得出结论:致病弧菌引起偷死(图1)。
2、治疗方案及结果图2 治疗成功,当年9月份收虾 使用乾界生物蛭弧菌(注:商品名,主要成分为噬菌蛭弧菌),1亩/300ml,5天/次。期间每次投完蛭弧菌,间隔2-3天后使用乾界生物欧雷思(注:商品名,主要成分为复合微生物制剂)。使用后,直至9月收虾,不再出现一只死虾(图2)。
(图2)
案例二:江苏南京梭子蟹育苗场荧光病
1、基本情况 2017年6月,江苏省南通市老板李明哲发现其梭子蟹育苗场三个育苗池暴发大规模荧光病。由于对该病的病原不清楚,因而进行了问诊。
2、临床症状及诊断分析图3 左侧为未使用AB池水样,弧菌数达5万个/ml;右侧为AB使用24小时后育苗池水样,弧菌数2万个/ml 肉眼检查:病蟹反应迟钝,蟹体全身均发荧光,在夜间病蟹活动时,可见到象火龙般的一道道荧光。实验室检查:从病蟹体内通过弧菌选择性培养基分离出形态均匀、大小一致的革兰氏阴性弧杆状细菌,而且水中弧菌的总浓度为5×105cfu/ml(图3)。
通过对分离菌进行生理生化特性鉴定和16S rRNA基因测序比对,结果证实分离菌为弧菌,故确定该病为弧菌感染所致。
3、治疗方案及结果图4 使用5天后,水体弧菌含量降至27个/ml 根据以上症状与诊断分析,结合育苗池底部24h增氧的有利条件,给养殖户制定了以下治疗方案:马上使用乾界生物蛭弧菌,每亩300ml,每隔2天连用两天,72小时内弧菌将至安全水平(图4)。
按照该方案使用后,病蟹明显好转,并逐渐痊愈。考虑到育苗池水中自然弧菌含量仍有复发可能,故在该病控制后,进一步建议养殖户巩固治疗继续使用乾界生物蛭弧菌,7天1次。该养殖户按照该方案进行育苗后蟹苗再也未发生包括荧光病在内的细菌病。
案例三:广东湛江市南美白对虾甲壳溃疡病
1、基本情况
图5 甲壳溃疡病
广东湛江市南三镇周老板有20亩的虾塘、每亩投放虾苗6-7万尾。2016年4月,该养殖户发现部分虾开始出现黑斑,即甲壳溃疡病(图5),而且其周边养殖户的虾也出现了普遍的黑斑病发病现象。
2、临床症状及诊断分析 肉眼检查:病虾反应迟钝,甲壳出现程度不一的黑褐色溃疡,溃疡中部凹陷,表现为数量不等的褐斑。解剖检查:病虾肝胰腺坏死,糜烂。实验室检查:从病虾肝胰腺组织中分离出形态均匀、大小一致的革兰氏阴性弧杆状细菌。通过对分离菌进行生理生化特性鉴定和16S rRNA基因测序比对,结果证实分离菌为弧菌。
3、治疗方案及结果
图6 病虾逐渐痊愈
使用乾界生物蛭弧菌,300ml/1亩,2天1次。按照该方案使用后3天,对虾不再死亡。之后继续使用乾界蛭弧菌、乾界净水欧雷思1次,病虾逐渐痊愈(图6)。 案例小结与讨论 饲养水产动物细菌病发生的原因,一是由于育苗池中弧菌大量繁衍,含量过高;二是水产动物在恶劣水环境中自身免疫力和抵抗力下降,经大量病菌侵袭而引发各类疾病。
在水产动物育苗及养殖过程中,要坚持防重于治的原则,定期检测水质和弧菌总量,每天巡塘。尤其是养殖中后期,随着水产动物的不断生长,残饵、粪便也逐渐增多,各种病菌,尤其是弧菌的含量增加。实践表明,一旦发现水中弧菌含量超过1000个/ml时,都需尽快使用乾界生物蛭弧菌进行预防。否则,极有可能暴发各类细菌感染,造成水产动物大规模死亡。
四、噬菌蛭弧菌必将成为提高虾蟹健康养殖水平的新秀
虾蟹养殖业已经成为我国水产养殖的特色产业和亮点经济,对农民的就业与社会稳定的维护具有重要作用。如湛江市养虾业及相关产业链就解决了当地60多万人的生活问题。然而,虾蟹养殖户在养殖过程中解决水体污染、药残等一些瓶颈时,往往存在这样或那样的问题。
例如,目前在我国渔药市场上,用于虾蟹养殖的药物五花八门,良莠不齐。不少虾(蟹)农缺乏药物基本知识,不清楚哪些药物残留时间长,哪些药物是水产养殖禁药,哪些药物毒性强,往往无意识地造成了对虾蟹产品的质量安全隐患;导致虾蟹发生中毒死亡。例如,对虾氯霉素事件曾使我国对虾产品屡遭限制和封杀;江苏盐城一养殖户因误用了硫酸铜和晶体敌百虫,使养殖的105亩水面的青虾和河蟹发生了大量中毒死亡。
因此,必须树立虾蟹无公害健康养殖理念,从虾蟹苗到“餐桌”的全过程要严格树立食品安全质量关。虽然近年来一些EM原露、光合细菌等微生态制剂在促进虾蟹健康养殖过程中扮演了重要的角色,但这些微生态制剂仅能在水质改良、增强免疫力等单一方面发挥功效,一旦虾蟹暴发细菌性病害,往往无能无力,而噬菌蛭弧菌制剂则不同。它不仅同时具备了这些绿色环保产品水质改良、增强免疫力的功效,而且还具有杀菌除菌、抗病治病的作用。而且,目前噬菌蛭弧菌及其剂型的开发研究已在国际上非常重视。可想而知,噬菌蛭弧菌制剂作为具有特色的一种新型绿色环保渔药,必将成为提高虾蟹健康养殖水平的新秀。
大规模养殖南美白对虾一亩放35-45万尾。
因为从养殖周期来看,放养密度为3-7万尾/亩之间时,随着密度的增加,养殖周期呈延长趋势。结合第一次的起捕规格,当放养密度小于4万尾/亩时,养殖周期较短,而且第一次的起捕规格较大,平均为41尾/500g,说明了此密度下的池塘水体未得到充分地利用,所以最终的亩产量也是最低的。当放养密度为4-7万尾/亩时,第一次起捕时规格差异不大,平均规格在50-53尾/500g左右,这与市场要求联系紧密,因为一般的对虾出售规格很少小于60尾/500g。
从日增重来看,4-7万尾/亩的放养密度范围内对虾日增重变化不大,趋于平稳,但结合成活率来看,却是随密度上升明显下降,考虑密度与成活率两个因素后发现,存塘虾的数量基本维持在37-43万尾/亩,说明了池塘环境能承受的容载量也在此范围之内。
亩产量的变化也可验证上述结论:当放养密度在3-7万尾/亩之间,并且逐步增大时,亩产量随之上升;且当放养密度在3-5万尾/亩时,随密度的升高,亩产量的增加更为显著;密度在5-7万尾/亩间增加时,亩产量的增加并不明显。这也说明了单位养殖水体存在一个最适的养殖容量,当放养密度小于最适养殖容量时,随放养密度的增加,亩产量会快速上升;当放养密度超过最适养殖容量后,亩产量变化不大,而养殖周期却延长。
放养密度的改变必然会引起池塘饲料的投喂量、池水中浮游生物的组成、浮游生物的生物量等发生改变,从而引起养殖周期、成活率、饵料系数和亩产量等相应的变化。在对虾土池养殖中,当放养密度较低时,水体中的浮游植物以硅藻为主;而高密度放养条件下,蓝球藻和裸甲藻的生物量占绝对优势,甚至超过总浮游植物生物量的一半以上,这两种藻类能分泌毒素抑制其它藻类的生长,这对池塘水质的管理及对虾天然饵料的补充上造成了极大的困难,也为对虾养殖的日常管理造成了困难。
而且,低密度养殖时,水体中浮游植物占优势,随着养殖密度的增大,则浮游动物占优势,这是因为高密度养殖条件下,水体有机污染严重,而在有机物含量较高的水体中,藻类的光合作用和生物量都会降低,从而引起了水难肥、水质变化剧烈、在天气变化时易发生水变等严重的后果。
结合上面的分析,放养密度结合苗种质量来考虑,初始放养密度×预计成活率控制在35-45万尾/亩最适宜
这种情况可能是池塘中有河虾或者别人把死河虾扔到你胡养殖塘的,你可以用海海生物的虾用合生元或者免疫雄兵来增强对虾的抵抗预防。
虾用合生元:1 本品可显著提高对虾成活率。长期使用本品,对虾健康养殖周期在原有基础上可以额外延长15天左右,有助于避开收虾高峰期,提高养殖效益。
2 本品能减少、甚至预防对虾疾病暴发,降低死亡率,促进对虾生长,增强对虾对诸多常见疾病和应激的抵抗力,提高对虾存活率。
3 本品可改善饲料品质,抑制饲料霉菌毒素活性。HSCAS可选择性吸附或直接与霉菌毒素结合,结合率可高,避免毒素对机体的毒害。
4 在南美白对虾饲料中添加本品,饲料中鱼粉用量可以降低,且生长效果显著。
5 在南美白对虾饲料中添加本品,能显著提高供试南美白对虾血清和肌肉中ACP和ALP活性,极显著提高肝胰腺中ACP、ALP和POD的活性,增强对虾抗弧菌感染能力。
6 在斑节对虾饲料中添加本品,可显著提高斑节对虾增重率、存活率,显著降低饲料系数。与添加高含量维生素C磷酸酯的效果一样。
免疫雄兵:专用于养殖虾、蟹、海参拌喂饵料使用。可有效降解饲料中黄曲霉毒素,预防肝胰脏病变,防止空肠空胃、白便、偷死综合症,对弧菌引起的免疫低下综合症有良好防治效果,同时具有促进消化吸收、调节免疫和改善应激等多重功效。
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