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解析:
尖锐湿疣的临床表现
临床表现多种多样。在生殖器温度较低而且干燥部位的损害常常表现为小而扁平状,而在温热、湿润部位者常呈丝状或乳突瘤状。
初起为细小淡红色丘疹,后逐渐增大增多相互融合,表面凹凸不平,湿润柔软,呈 瘤样,鸡冠样,草样,蕈样或菜花样突起,红色或污灰色,根部常有蒂,个别发生糜烂渗液,易出血。皮损裂缝间常有脓性分泌物郁积其中,致有恶臭,自觉有痒感且每因搔抓而引起继发感染。由于不断受到局部潮湿与慢性 的作用,往往迅速增长。有的女性患者甚至从外阴至 、宫颈等处都长满了一片毛棘或很多小菜花状突起,好似玫瑰色的芒刺或鸡冠花。
目前对尖锐湿疣的治疗多采用局部疗法与全身疗法相结合。 中国医学健康网
(1)局部治疗
①一般治疗:保持外阴清洁干燥。积极治疗与尖锐湿疣同时存在的其他 炎症和盆腔炎症,以减少 分泌物,从而减少对外阴的 。清洁外阴可以用1∶5000的高锰酸钾液外洗,也可以使用中草药。
②药物治疗:对较小的疣体可采用局部上药。选用:
25%足叶草脂酊,用棉签蘸药液涂于病灶处,4小时后用肥皂水彻底清洗干净,以免灼伤皮肤。3天后如果未愈,可重复用药。因本药有较强的 性并且有毒,故用药前需要用凡士林将周围正常组织保护好。 内及宫颈禁止使用本药。另外,由于本品能导致畸形,因此孕妇禁用。合并感染、糖尿病患者、血循环不良者及儿童也不宜使用。此药长期应用有可能引起恶心、呕吐、神经炎、心动过速等病症。
50%的三氯醋酸溶液外涂,每周1次,应用1~2次。使用时也要保护周围正常的皮肤粘膜。
5氟脲嘧啶软膏:外涂患处,每日1~2次。不要涂在正常组织上。孕妇禁用。
1%酞丁胺霜:外涂患处,每日3次,4~6周为1疗程,一般4周内可治愈。
③物理治疗:激光、冷冻、电灼是目前应用较多的方法,适用于孤立的病灶。一般讲,激光治疗易于控制,出血少,术后痊愈快,一次治愈率能达95%以上,并且不遗留疤痕或癍痕平滑。冷冻法的治愈率也能达90%。冷冻后局部组织发生坏死和溃疡,一般持续1周,2~3周后愈合,再间隔1~2周后可以重复治疗。一个疗程为1~7次。电灼法如果使用者技术良好,治愈率能达到激光治疗的水平。
物理方法治疗后湿疣都有可能复发。
④手术治疗:对较大的疣体可应用手术切除。
(2)全身用药
病毒灵每次服1片,每日3次。
干扰素:此为免疫疗法,用法尚在试验中。
总之,尖锐湿疣的治疗目前仍以局部治疗为主,全身用药需要与局部治疗相结合。
患有尖锐湿疣是可以结婚的。但是,尖锐湿疣患者在未完全治愈的情况下,不应进行性行为。即使使用保护措施,如:避孕套等,也不能完全杜绝感染的风险。
尖锐湿疣最常见的传播途径是性传播,在性交过程中带有病毒颗粒的角质细胞,通过细小的损伤进入健康方的表皮内并在此处定植,后期增殖、分化、增生形成外生疣体,从而导致健康方感染尖锐湿疣。
既然菇凉你觉得自己那么倒霉, 那么洁身自好为什么要受这种苦,就给你算算账吧:
1 先一起治疗,不要急着分手。
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首先你要明白他是一种幸福年的传播疾病,但是绝大多数都是通过这个渠道进行传播的。有可能有其他的特殊渠道几个例子,比如说去酒店共用一些毛巾。还有陆金蛋糕。这种情况也是有极少数的机会去感染,你说是否分手其实就是指你自己本身没有感染这个病毒。但是他感染了这个病毒,说明他在性方面是一个混乱的状态。但是两个人在一起要比较很多方面,比如说兴趣爱好,比如说思想观念,比如说家庭背景,比如说受教育程度。你要是觉得这个方面你无法对他进行改编或者是难以接受的话,那你肯定是要趁早的离开。因为啥呢?因为通过这个行为已经说明了在和你相处的过程当中已经有第三个人进来了,所以说这是一件比较羞耻的事情。如果你选择原谅他,给他一次机会,并且她也做的非常好,以后还是坚定地跟你在一起走下去,那这种情况你就当然可以选择饮料,但是未来还是有不确定性的。所以说这个事情在于你自己在一个我要提一点这个病毒,不要过分的担心她不会危及生命,赶快赵医生做手术,把疣体切掉。
分类: 烦恼 >> 两性问题
问题描述:
我朋友刚查出得了尖锐湿疣,我们上个月有过性行为,是带套的,我会传染上吗
解析:
尖锐湿疣
概述
本病又称尖圭湿疣、生殖器疣或性病疣。是由人类 瘤病毒(HPV)感染引起的一种性传播疾病。HPV有多种类型,引起本病的主要类型为HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型等,其中HPV16和18型长期感染可能与女性宫颈癌的发生有关。
诊断
1.不洁 史。
2.典型皮损为生殖器或肛周等潮湿部位出现丘疹, 状、菜花状或鸡冠状肉质赘生物,表面粗糙角化。
3.醋酸白试验阳性,病理切片可见角化不良及凹空细胞。
4.核酸杂交可检出HPV-DNA相关序列,PCR检测可见特异性HPV-DNA扩增区带。
治疗措施
由于目前没有特效的抗病毒药物,尖锐湿疣的治疗必须采用综合治疗。
(一)治疗诱因:(白带过多,包皮过长、淋病)。
(二)提高机体免疫力。
(三)应用抗病药物。一般只要坚持规则的综合治疗都可治愈。
1. 手术疗法
对于单发、面积小的湿疣,可手术切除;对巨大尖锐湿疣,可用Mohs氏手术切除,手术时用冷冻切片检查损害是否切除干净。
2. 冷冻疗法
利用-196℃低温的液体氮,采用压冻法治疗尖锐湿疣,促进疣组织坏死脱落,本法适用于数量少,面积小的湿疣,可行1-2次治疗,间隔时间为一周。
3. 激光治疗
通常用CO2激光,采用烧灼法治疗尖锐湿疣,本疗法最适用女阴、 或肛周的湿疣。对单发或少量多发湿疣可行一次性治疗,对多发或面积大的湿疣可行2-3次治疗,间隔时间一般为一周。
4. 电灼治疗
采用高频电针或电刀切除湿疣。方法:局部麻醉,然后电灼,本疗法适应数量少,面积小的湿疣。
5. 微波治疗
采用微波手术治疗机,利多卡因局麻,将杆状辐射探头尖端插入尖锐湿直达疣体基底,当看到就体变小、颜色变暗、由软变硬时,则热辐射凝固完成,即可抽出探头。凝固的病灶可以用镊子挟除。为防止复发,可对残存的基底部重复凝固一次。
6. β-射线治疗
我们应用β-射线治疗尖锐湿疣取得了较为满意的效果,该方法疗效高,无痛苦、无损伤、副作用少,复发率低,在临床上有推广价值。
7. 药物疗法
(1)足叶草脂:本疗法适用湿润区域的湿疣,例如发生于包皮过长而未曾作包皮环切除手术的 及会 的湿疣。但对宫颈尖锐湿疣不能用足叶草脂治疗。用20%足叶草脂酊剂涂到皮损处或用药前,先有油质抗菌药膏保护皮损周围的正常皮肤或粘膜 ,然后涂药,用后4-6小时,用30%硼酸水或肥皂水清洗,必要时3天后重复用药,该药是国外用于本病治疗的首先药,一般用一次可愈。但有很多缺点,如对组织破坏性大,使用不当可引起局部溃疡。毒性大,主要表现为恶心、肠梗阻、白细胞及血小板减少,心动过速、尿闭或少尿,故使用时必须谨慎,发现上述反应时,应立即停药。
(2)抗病毒药:可用5%酞丁胺霜剂,或用025%疱疹净软膏,每日2次,外涂。无环鸟苷口服,每日5次,每次200mg,或用其软膏外用,α-干扰素每日注射300万单位,每周用药五天。或干扰素300万单位注入疣体基部,每周2次。连用2-3周,主要副作用为流感样综合症,局部用药副作用较少且轻微。
(3)腐蚀剂或消毒剂:常用有30%-50%三氯醋酸或饱和二氯醋酸,或18%过氧乙酸。用10%水杨酸冰醋酸或40%甲醛、2%液化酚、75%乙醇蒸馏水100ml混合溶液,点涂局部,用于 、肛周湿疣,每日或隔日一次,效果甚好。消毒剂可用20%碘酊外涂,或25-5%碘酊注射于疣体基部,每次01-15ml,或用新洁尔灭外涂或以01-02%外敷,后者需配合全身疗法。
(4)抗癌药
① 5-氟脲嘧啶(5-F u):一般外用5%软膏或霜剂,每日2次,3周为一疗程。25%~5%氟脲嘧啶湿敷治疗 、肛周尖锐湿疣,每次敷20分钟,每日一次,6次为一疗程。也可用聚乙二醇作基质,加入占其干质5%的5- F u粉剂制成栓剂,治疗男女尿道内尖锐湿疣,也可用5- F u基底注射,多者可分批注射。
② 噻替哌:主要用于5-F u治疗失败的尿道内尖锐湿疣,每日用栓剂(每个含15mg),连用8天,也可将本品60mg加入10-15ml消毒水中,每周向尿道内滴注,保持半小时,副作用有尿道炎。亦可用本品10mg加入10ml浸泡患处,每日3次,每次半小时,治疗 、 冠状沟湿疣,主要用于经其它方法治疗后,尚有残存疣体或复发者。也可将此溶液再稀释两倍浸泡局部,以预防复发。
③ 秋水仙碱:可用2-8%的生理盐水溶液外涂,涂两次,间隔72小时治疗 湿疣,涂后可出现表浅糜烂。
④ 争光霉素或平阳霉素:用01%的生理盐水溶液作皮损内注射,每次总量限制在1毫升(1 mg),大多一次可愈。平阳霉素为争光霉素换代品,用法基本相同,亦有用平阳霉素10 mg溶于10%普鲁卡因20ml内注射。
8.免疫疗法
① 自体疫苗法:用病人自己的疣体组织匀浆(融冷灭活病毒),并进行加热处理(56℃一小时)收集上清液注射,可用于顽固性肛周湿疣。
② 干扰素诱导剂:可用聚肌胞及梯洛龙。聚肌胞每日注射2 ml,连用10天,停药1-2月后,再继续用药。梯洛龙每日3次,每次300 mg,停药4天,或隔日口服600 mg。
③ 干扰素、白介Ⅱ,灵杆菌素,利百多联合应用,疗效较佳。
病原学
HPV在皮肤上引起疣赘、在咽部、肛周、生殖器粘膜上形成增殖性病变,其病毒型为小型DNA病毒。感染HPV发生病变多数属于良性,能自行消退,但也有恶化病例。如肛周、生殖器粘膜上形成扁平上皮癌的报道。还有罕见的遗传性皮肤疾患、疣赘状表皮发育异常症(EV)续发的皮肤癌等,在癌细胞中检出HPV。
HPV为乳多空病毒科A属成员,病毒颗粒直径50-55nm无被膜的正20面体构成的病毒壳体,具有7900碱基对的环状双链DNA组成,电镜下病毒颗粒的大小、形态与口多瘤病毒极为相似。 瘤病毒(PV)具有种属特异性,HPV尚未能在组织培养或实验动物模型中繁殖。
病毒的结构蛋白组成:85%的PV颗粒,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS——PAGE)可确定病毒有主要衣壳蛋白、分子量为56000;次要衣壳蛋白,分子量迁移于76000处,发现4种细胞组蛋白与病毒DNA相关。
所有HPV病毒的基因组结构相似,根据在严格条件下进行DNA杂交的程序可确定病毒的型和亚型,不同的HPV型DNA与其他类型病毒DNA仅50%出现交叉杂交,迄今已发现60多种HPV类型,随着研究的深入,将会鉴定出更多HPV新的类型。
发病机理
尖锐湿疣的HPV感染通过性接触传播,接触部位的小创伤可促进感染,三种鳞状上皮(皮肤、粘膜、化生的)对HPV感染都敏感。每一型HPV与特殊的临床损害有关,且对皮肤或粘膜鳞状上皮各有其好发部位。当含有比较大量病毒颗粒的脱落表层细胞或角蛋白碎片进入易感上皮裂隙中时,感染就可能产生,它可因直接接触或少见的自动接种或经污染的 、浴盆、浴巾、便盆感染。
病毒感染人体后,可潜伏在基底角朊细胞间,在表皮细胞层复制,HPV侵入细胞核,引起细胞迅速分裂,同时伴随病毒颗粒的繁殖与播散,形成特征性的 瘤。晚期基因表达结构多肽,即出现结构蛋白装配颗粒,病毒主要集中在颗粒层中的细胞核内,在表皮的颗粒层出现凹空细胞增多,组织学上正常的上皮细胞也有HPV,治疗后残余的DNA常可导致疾病的复发。
宿主对HPV感染引起的免疫应答,包括细胞免疫与体液免疫两个方面。
一、细胞免疫
人体细胞免疫状态是影响CA发生、转归的重要基础之一。细胞免疫比体液免疫更为重要。临床上伴细胞免疫缺陷的尖锐湿疣患者皮疹常持续不退,其外周血中抑制性T细胞数增多NK细胞功能低下,r-干扰素和白细胞介素2产生减少,而消退疣皮损中常常出现活化T细胞和NK细胞的浸润,部分角朊细胞HLA-DR阳性。
免疫抑制或免疫缺陷时,生殖器HPV感染和HPV相关疾病的发生率均增加。尖锐湿疣中辅助性T细胞耗竭,CD4/CD8比值倒置,其值<1。在CA病人的外周血中,发现抑制/细胞毒性T细胞百分率显著增高,辅助/诱导性T细胞的比值和辅助/抑制T细胞比值均降低。宫颈CA和宫颈上皮内瘤样病变(CIN)病损中朗格罕细胞明显减少。CA中NK细胞 产生r-干扰素和白介素-2减少。鲍温样丘疹病和 生殖器癌者中NK细胞对含有HPV-16的角朊细胞的溶解活性下降,可能是对疾病特异性靶细胞的识别缺陷所致,宫颈CA的角朊细胞不表达MHCⅡ型抗原(HLA-DR),无此抗原提呈功能可以破坏免疫监视作用。
二、体液免疫
目前血清学检测结果显示:①抗晚期蛋白抗体产生率为25%-65%,较抗早期蛋白抗体产生率高;②检测出的HPV抗体似有型特异性,无交叉反应;③抗HPV-16E7抗体与宫颈癌的存在有密切关系;④抗HPV-16E4抗体也是发生宫颈癌、复发或近期HPV感染的标志;⑤估计成人和儿童产生IgG抗体的阳性率相同,不同型别阳性率在10%-75%之间;⑥已证明HPV-16或18型肿瘤抗体阳性患者中,仅50%-70%可检出该抗体。
三、尖锐湿疣自然消退
对CA自然消退尚无系统评估,然而以安慰剂对照研究发现其自然消退率在0%,17%、18%和69%之间,CA消退或治愈后,仍有45%患者存在潜伏感染,其中67%患者复发。
流行病学
一、流行情况
尖锐湿疣为人类 瘤病毒所引起。目前一致认为此病在增多,成为STDS中的最常见疾病,在年轻成人中患病率可达05%-1%。英国尖锐湿疣发病率从1970年的30/10万增到1988年的260/10万,几乎增加了8倍,美国此病发病率从1966年到1984年增加了6倍。和艾滋病相似,有症状的尖锐湿疣仅代表感染者的“冰山”之顶,所以如考虑亚临床感染在内,人类 瘤病毒感染可能是发病率占第一位的性病。此感染的传播方式包括直接与间接传播,但以性接触最为常见,而且越是近期损害越有传染性,一次性接触估计有50%被传染的可能性;其次为直接非性接触,如自体传染以及新生儿经产道受染;再其次为间接接触,通过污染传染、推测有可能,但因此病病毒尚不能培养,未能证实。
二、尖锐湿疣发生的危险因素
(一)性行为:性伴数及过早 是造成发生HPV感染的因素。
(二)免疫抑制:HPV感染和与HPV有关的癌似乎是慢性免疫功能抑制的晚期并发症。肾异体移植者中患CA的危险性增加。
(三)HIV感染:HIV阳性发生HPV感染及HPV相关肿瘤的机率增加。
(四)年龄,妊娠:在妇科涂片中检测HPV高峰流行率的年龄为20-40岁,随着年龄增加,流行率稳步下降;妊娠期间的HPV检出率高,产后HPV检出率下降。
临床表现
潜伏期3周到8个月,平均3个月,多见于性活跃的青、中年男女,发病高峰年龄为20-25岁,病程平均在3-5个月的男女患者,在性接触后不久即发病,而病程平均12个月的男性患者,其性接触者可不发病。多数患者一般无症状。损害大小及形状不等。可仅为数个,亦可为多数针头样大的损害:在阴肛部可长成大的肿瘤样物,有压迫感;有恶臭味;有时小的湿疣可出现 痛痒不适,病人可出现尿血和排尿困难;直肠内尖锐湿疣可发生疼痛、便血,而直肠内大的湿疣则可引起里急后重感。
男性患者好发于包皮系带、冠状沟、包皮、尿道、 、 周围和阴囊。病初为淡红或污红色粟状大小赘生物,性质柔软,顶端稍尖,逐渐长大或增多。可发展成 状或囊状,基底稍宽或有带,表面有颗粒。在 部常增大,状如菜花,表面湿润或有出血,在颗粒间常积存有脓液,散发恶臭气味,搔抓后可继发感染。位于湿度较低干燥部位的生殖器疣,损害常小而呈扁平疣状。位于湿热湿润部位的疣常表现为丝状或 瘤状,易融合成大的团块。有严重肝病的患者湿疣可增大。妊娠可使湿疣复发或生长加快。
亚临床感染是指临床上肉眼不能辨认的病变,但用3%-5%醋酸液局部外涂或湿敷5-10分钟可在HPV感染区域发白,即所谓“醋酸白现象”。
HPV感染和肿瘤的发生:
(一)HPV与皮肤肿瘤的发生有关
它在皮肤癌和其他解剖部位的肿瘤似乎起决定作用。口腔良性赘生物和癌前病变,皮肤鳞状细胞癌组织中可发现HPV-11、16、18型DNA,曾报道喉部HPV-6 瘤恶变成喉癌,皮肤疣状表皮发育不良(EV)是HPV潜在致癌作用的证据,EV皮损中发现多种HPV型DNA,并在患者皮肤鳞状细胞癌中检出HPV-5、8、14、17及20型,皮肤鳞状细胞癌似乎是由先已存在的病毒性损害恶变而来。
(二)尖锐湿疣与 生殖器癌
生殖器癌与HPV类型有一定的关系。利用DNA杂交技术发现生殖器癌组织中存在HPV-6、11、16、18型等。
1.宫颈癌:根据HPV与宫颈癌的关系,可将其分为两大类型:低危型主要指HPV-6、11型,高危型是指HPV-16、18型,Gis ann等观察到在侵袭性宫颈癌中,有574%患者存在着HPV-16、18型,其他学者也有相同发现。还有人从侵袭性宫颈癌中分离出HPV-33和35型。
2.皮肤鳞状细胞癌(SCC):HPV感染而发生的CA也可能是癌前损害,并可发展成 生殖器SCC,这表明HPV是女阴、 及 生殖器SCC的重要因素。CA,巨大CA和疣状SCC组成一个生殖器癌前病变和癌的损害病谱,有些部位生殖器癌病例在其周围皮肤有CA存在,有时肉眼见为典型的CA,但组织学检查中发现SCC的孤立病灶。
3.鲍温样丘疹病:常见于 、女阴或 周围,曾在皮损内发现HPV-16型DNA。
辅助检查
一、醋酸白试验
用3-5%醋酸外涂疣体2-5分钟,病灶部位变白稍隆起, 病损可能需要15分钟。本试验的原理是蛋白质与酸凝固变白的结果,HPV感染细胞产生的角蛋白与正常的未感染上皮细胞产生的不同,只有前者才能被醋酸脱色。醋酸白试验检测HPV的敏感性很高,它比常规检测观察组织学变化还好。但偶尔在上皮增厚或外伤擦破病例中出现假阳性、假阳性变白迹象显得界限不清和不规则。美国CDC提示,醋酸白试验并不是特异试验,且假阳性较常见。
二、免疫组织学检查
常用过氧化物酶抗过氧化物酶方法(即PAP),显示湿疣内的病毒蛋白,以证明疣损害中有病毒抗原。HPV蛋白阳性时,尖锐湿疣的浅表上皮细胞内可出现淡红色的弱阳性反应。
三、组织化学检查
取少量病损组织制成涂片,用特异抗人类 瘤病毒的抗体作染色。如病损中有病毒抗原,则抗原抗体结合。在过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)方法中,核可被染成红色。此法特异性强且较迅速,对诊断有帮助。
四、病理检查
主要为角化不全,棘层高度肥厚, 瘤样增生,表皮突增厚,延长,其增生程度可似假性上皮瘤样。刺细胞和基底细胞并有相当数量的核分裂、颇似癌变。但细胞排列规则,且增生上皮和真皮之间界限清楚。其特点为粒层和刺层上部细胞有明显的空泡形成。此种空泡细胞较正常大,胞浆着色淡、中央有大而圆,深嗜碱性的核。通常真皮水肿、毛细血管扩张以及周围较致密的慢性炎性浸润。Buse-loewenstein巨大型尖锐湿疣,表皮极度向下生长,代替了其下面的组织、易与鳞状细胞相混,故须多次活检。若有缓慢发展之倾向, 则为一种低度恶变的过程,即所谓疣状癌。
五、基因诊断
迄今,HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测,主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点,为HPV检测开辟了新途径。
(一)标本的采集及处理
1.标本的采集和预处理:用刮板或生理盐水浸润的棉棒从 和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时,将标本放入5ml含有005%硫柳汞的PBS中,用PBS离心(3000g,10min)洗涤2次,沉积细胞重悬于1mlPBS中,取05ml细胞悬液抽提DNA。
2.标本核酸的提取:按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液(10mmol/L Tris-HCl,pH 74,10mmol/L EDTA,150mmol/L NaCl,04%SDS,10mg/ml蛋白酶K)37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1),氯仿/异戊醇(24:1)各抽提2次;加1/10体积3mol/L NaAc(pH 52)及25倍体积无水乙醇置-20℃ 2h或过夜沉淀DNA;加1体积乙醇洗涤1次;用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/L Tris-HCl,pH 80,10mmol/L EDTA)溶解DNA,37℃温育30min。
(二)PCR扩增
1. 引物设计和合成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L),每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列分析表明,各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1,该引物与HPV 6、11、16、18及33型有互补序列,也可扩增其它型HPV。
2.PCR反应试剂:Taq DNA聚合酶(2U/ml)、10mmol/L dNTP贮备液(dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L),10×PCR缓冲液(500mmol KCl、40mmol/L MgCl2、100mmol/L Tris-HCl、pH 85),100μmol/L MY11和MY09贮备液,灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。
3.PCR扩增方法和程序:以100μl PCR反应液,用无菌05ml硅化塑料离心管为反应管进行扩增反应。
(1)实验前配制预混反应试剂并分装。预混反应试剂包括除标本DNA外的其它各种PCR反应试剂。
(2)各反应管依次加入10μl标本和90μl预混反应试剂。
(3)加入80-100μl石蜡油,在台式离心机上快速离心数秒钟,使各反应试剂收集于油层下。目前,PCR试剂已商品化,反应体积为25μl。使用时只加入标本DNA即可。
(4)将反应管置PCR扩增仪上,循环参数为95℃ 30s,55℃ 40s,72℃ 50s循环35次,最后72℃延伸5min。
4.每次试验应设阳性及阴性对照。以载有HPV的重组质粒(每反应为100pg)或含有HPV的细胞系(如Caski、HeLa)DNA为阳性对照,以无HPV的人细胞系DNA为阴性对照。
(三)扩增产物的检测和分析
1. 凝胶电泳:扩增反应结束后,取出反应管,冷却至室温,取10μl扩增产物用5%-7%聚丙烯酰胺凝胶或15%琼脂糖电泳,溴化乙锭染色,紫外分析仪下分析结果,分子量约为450bp处出现明显的DNA带。
2. 核酸杂交:如果凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时,可用标记的公用混合探针和(或)型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。
按照标准方法制32P ATP标记的寡核苷酸探针,需达到约107cpm/pmol特异活性。杂交液中需含有2×106-5×106cpm探针/ml。在55℃缓慢振荡下杂交2-3h,随后于30-55℃下用洗涤液(2×SSC、01%SDS)迅速冲洗杂交膜,除去多余探针。然后进行洗膜,其条件依所用探针而异:公用混合探针,55℃洗膜10min;MY12、MY13及MY16探针,56-57℃下10 min,并换液重洗1次;MY14及WD74探针,58-59℃下10min,亦换液重洗1次。
用PCR方法检测HPV比核酸杂交方法优越。其敏感性高,GP-PCR方法以凝胶电泳直接分析结果,可检出标本中200个拷贝的HPV DNA,若以核酸杂交检测PCR产物,敏感性提高,能检出10个拷贝的HPV DNA。
鉴于PCR技术的高度敏感性,以生殖道脱落细胞为检材足以满足试验要求,避免了活检取材、研磨组织繁杂操作。一般情况下,PCR扩增产物经凝胶电泳,观察产生的DNA可直接作出诊断。因此,PCR技术检测HPV实验周期短、简便快速。
鉴别诊断
1.生殖器鳞癌;多见于40岁以上或老年人,皮损向下浸润,发生溃疡,组织病理有特征性改变。
2.扁平湿疣:为多个湿丘疹融合成片状的皮损,多见于肛周,皮损处可查到梅毒螺旋体,梅毒血清试验呈阳性反应。
3.珍珠状 丘疹病:为沿冠状沟排列,针头及粟粒大小的皮色或淡粉红色丘疹。组织病理无凹空细胞。
4.假性湿疣;损害为局限于小 的粟粒大呈鱼卵状淡红色小丘疹或绒毛状改变,皮损表面光滑,醋酸白试验阴性,病理上无具有诊断意义的凹空细胞。
5.鲍温样丘疹病;为棕红色或色素性小丘疹,组织病理可见异型鳞状细胞及类似原位癌的组织象。
预防
控制性病是预防CA的最好方法。发现治疗患者及其性伴;进行卫生宣教和性行为的控制; 套具有预防HPV感染的作用,目前尚无有效疫苗。
你好,虽然衣物等传染的几率低,但也具有传染性的。如果没有证据,就不要瞎怀疑了;即使他犯了错,这次他也应该得到教训了,原谅他一次吧,俗话说“百年修得同船渡,千年修得共枕眠”姻缘来之不易,好好珍惜吧。你现在观察就可以了,如果6-9个月不发病,就没有问题了。
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