RFLP和RAPD技术的第三节 RAPD技术

RAPDs标记 随机扩增多态性(Random Amplified PolymorphicDNA，RAPDs)标记是Williams等于1990年建立的通常以1O碱基的寡核苷酸序列为引物，对基因组DNA随机扩增，从而得到多态性图谱作为遗传标记的方法。与RFLP相比，RAPD的优点是对DNA质量要求不高，需要量极少，操作简单易行，不需要接触放射性，一套引物可用于不同生物的基因组分析，检测整个基因组，两条引物配对使用，能产生新的带型，

— 4 —江苏农业科学2003年第2期可以找到更多的标记，但不足之处是，绝大部分RAPD是显型标记，不能区分基因型是纯合或是杂合的，每个标记提供的信息量少，再者重复性差。RAPD标记一般为重复序列，若不是重复系列，也可将其转化为RFLP标记，进一步检测RAPD分析的结果。 1、随机引物(10mer) (5umol/L)：购买成品。

2、Taq酶：购买成品。

3、10xPCR 缓冲液：配方见第八章。

4、MgCl2 ：25mmol/L。

5、dNTP：每种25mmol/L。 1 在25ul反应体系中,加入

模板DNA 1ul (50ng)

随机引物 1ul (约5pmol)

10xPCR Buffer 25ul

MgCl2 2ul

dNTP 2ul

Taq酶 1单位（U）

加ddH2O 至 25ul

混匀稍离心, 加一滴矿物油。

2 在加热至90℃以上的PCR仪中预变性94℃ 2分钟, 然后循环: 94℃ 1分钟， 36℃ 1分钟， 72℃ 1分钟，共40轮循环。

3 循环结束后, 72℃ 10分钟，4℃保存。

4 取PCR产物15ul加3ul上样缓冲液(6x)于2% 琼脂糖胶上电泳, 稳压50-100V（电压低带型整齐， 分辨率高）。

5 电泳结束，观察、拍照。

[注意] 1、电泳时一般RAPD带有5-15条, 大小01-20kb。

2、 特异性的DNA带可以克隆作为一个新的分子标记应用。 原理RAPD技术是建立在PCR技术的基础上，它用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基序列的寡核苷酸单链(一般为10个bp)作为引物，对所研究的基因组DNA进行单引物扩增。模板DNA经90—94变性解链后在较低温度(36～37℃)下退火，这时形成的单链模板会有许多位点与引物互补配对，在72℃下，通过链延伸，形成双链结构，完成DNA合成。重复上述过程，即可产生片段大小不等的扩增产物，通过电泳分离和显色便可得到许多不同的条带，从中筛选出特征性条带。扩增产物片段的多态性反映了基因组DNA的多态性。如果基因组在这些区域内发生DNA片段插入、缺失或碱基突变就可能导致这些特定结合位点的分布发生相应的变化，而使PCR产物增加、缺少或发生分子量的改变。因此，通过对PCR产物的检测即可测出基因组DNA在这些区域的多态性。进行RAPD分析时，可用引物的数量很大，虽然对每个引物而言，其检测基因组DNA多态性的区域是有限的，但是利用一系列引物则可以使检测区域几乎覆盖整个基因组。因此，RAPD可以对整个基因组DNA进行多态性检测。

RAPD技术的优点：①不使用同位素，减少了对工作人员健康的危害；②可以在物种没有任何分子生物学研究的情况下分析其DNA多态性；③对模板DNA的纯度要求不高；④技术简单，无需克隆DNA探针，无需进行分子杂交；⑤灵敏度高，可提供丰富的多态性；⑥RAPD引物没有严格的种属界限，同一套引物可以应用于任何一种生物的研究，因而具有广泛性、通用性。

但是，RAPD技术较易受到各种因素的影响。无论是模板的质量和浓度，短的引物序列，PCR的循环次数，基因组DNA的复杂性，技术设备等，都有可能是RAPD技术重复性差的直接原因。目前，多从以下几个方面来提高反应的稳定性：①操作规范，反应体系的组成要力求一致，尽可能地使RAPD反应标准化；②提高扩增片段的分辨率；③将RAPD标记转化为SCAR标记后再进行常规的PCR分析，可以提高反应的稳定性及可靠性。

2　RAPD技术在鱼类、虾蟹类研究中的应用

21在遗传资源研究中的应用

目前，海产虾、蟹类遗传变异的检测大多通过检测同工酶的变异来进行，所揭示的同工酶的多态性相对较低。RAPD分析中所需的样品量极少，其操作程序简单易行，实验周期短，因而可以对数量较多的样品进行分析。利用一套引物可得到不同种属、品系、群体甚至是个体的大量的RAPD分子标记，并可借助于计算机进行系统分析，RAPD技术的这些特点使得它可以在虾、蟹类群体遗传学、遗传多样性分析中发挥重要作用。

RAPD标记可以用来进行虾、蟹类群体遗传学研究，检测种群内、种群间的遗传多样性水平，并为种群识别提供可靠的遗传标记。Garcia等尝试在斑节对虾中利用RAPD分析不同地理群体间的遗传多样性，并就其在虾类选育中的应用作了初步探讨。Garcia以及A1civar—Warren等在高健康(High Health Shrimp)和无特异病原(Specific—Pathogen—Free，SPF)的南美白对虾培育中，用RAPD技术对野生种群以及不同的家系进行监测和分析，发现其多态位点的比例为50%左右，其中一个家系的多态位点比例高达77%。刘萍等用RAPD技术对中国对虾黄渤海沿岸种群亲本及子一代的基因组DNA多态性进行了研究，结果证实子代之间的遗传距离比其父母与子代之间更小，遗传变异程度更低。邱高峰等用RAPD技术分析了我国近海烟台、长岛等4个地方的20只中国对虾的种群内和种群间遗传差异，结果表明不同地理种群之间存在一定程度的遗传差异。石拓等，刘萍等、刘振辉等对中国对虾不同地理种群的遗传多样性进行了RAPD分析，结果表明，中国对虾的遗传多样性水平较低。高志干等对中华绒螯蟹的辽河和长江种群进行RAPD分析，结果显示，其种内遗传变异较低，3个种群中，辽河种群和颐江种群遗传变异较高，而长江种群遗传变异较低；辽河种群间遗传距离小于它们与种群间的遗传距离。甘西等利用RAPD技术对罗氏沼虾的NY群体和NX群体的遗传多样性进行了研究，NY群体的变异明显小于NX群体。宋林生等及庄志猛等用RAPD技术研究了日本对虾野生种群和养殖种群的遗传结构，结果表明，野生种群多态性位点的比例和杂合度明显高于养殖群体，说明中国沿海的日本对虾野生种群的种质资源状况较好，应加以保护。

一个较为详细的遗传连锁图谱不仅对该物种的遗传学基础研究有重要意义，同时对该物种的育种研究也很有帮助。Potlethwait和Stephen等用RAPD技术进行斑马鱼遗传连锁图谱的制作。Liu把RAPD技术应用到鲶鱼基因图谱研究中。孙效文等建立了鲤鱼的遗传连锁图谱。图谱有RAPD分子标记56个，鲤鱼的SSLP标记26个，鲫鱼的SSLP标记有19个，斑马鱼的SSLP标记有70个，鲤鱼基因标记91个，图谱有50个连锁组，连锁图给出鲤鱼的基因组大小在5789cm左右。

22确定种、品种间的亲缘关系

种群亲缘关系的传统研究方法是从形态学、细胞学、生化指标等方面进行，但受个体和环境的影响较大，有时不能反映物种本身所固有的特征。物种基因组的组成在RAPD图谱上得到体现，亲缘关系越近，基因组中的同缘序列越多，则以相同引物扩增出的共有标记也就越多。因此，RAPD技术与传统方法结合是研究物种亲缘关系的有效手段。对不同种、同种不同群体的DNA进行RAPD分析，筛选出特征性条带，计算相似系数和遗传距离，从而可确定它们的亲缘关系。李思发等用RAPD技术研究中国沿海六水系绒螯蟹(中华绒螯蟹和日本绒螯蟹)群体的亲缘关系，从48个引物中筛选出2个具有群体特异性的引物，其中Z2扩增的880bp片段为珠江蟹和南流江蟹两群体所共有，扩增的700bP片段为长江蟹、黄河蟹、辽河蟹、瓯江蟹四群体所特有。这可作为区别中华绒螯蟹(长江蟹、黄河蟹、辽河蟹、瓯江蟹)和日本绒螯蟹(珠江蟹、南流江蟹)的分子遗传标记。用RAPD技术对中国沿海六水系绒螯蟹进行两大类型划分与生化遗传差异分析、形态特征多元分析的结果一致。宋林生等用RAPD方法研究对虾属六个种间的亲缘关系，用20个随机引物扩增，共得到364条清晰稳定的多态性片段，根据扩增片段的共享度计算相对遗传距离指数，然后用UPGMA和NJ等聚类方法对其进行分析，构建系统树，确定了它们之间的亲缘关系。聚类分析的结果为：中国对虾、长毛对虾和墨吉对虾三者的关系最近，它们首先聚类在一起，然后与斑节对虾聚在一起，最后是南美白对虾和日本对虾。从其结果可以看出，外部形态比较相似的种类在基因组DNA上表现出较大的相似性，反之则较小。宋林生等用RAPD方法研究六种海产虾类基因组DNA多态性，结果显示六种虾的亲缘关系与传统的分类结果基本一致。谢浩等用RAPD方法研究三种绒螯蟹的亲缘关系，用一组引物对每种各10个个体的基因组DNA进行扩增，得到一批特异、可重复的扩增图谱。扩增区带相似串的分析结果表明，中华绒螯蟹与日本绒螯蟹的亲缘关系较远，而南流江的绒螯蟹(合浦亚种)与日本绒螯蟹较近。

Borrwsky等用随机引物扩增产物重新构建了脊椎动物DNA指纹图。Sultman等用DNA标记对丽鱼科鱼类的系统发育进行了研究。何舜平等运用RAPD的方法对五种鲤科鱼类进行了分析，并论述了鮈鲫的系统位置。何舜平等通过对鲤科鱼类的随机扩增，获得了大量有系统发育信息的DNA多态片段，并绘制了低等鲤科鱼类代表属种的分支系统图。夏德全等用RAPD方法分析太湖大银鱼、太湖新银鱼和寡齿新银鱼的亲缘关系，同时发现有个别样品的核基因组与太湖中已有的几种银鱼有显著差异。邹曙明等用RAPD方法研究草鱼、柏氏鲤和3个地理种群鲤的亲缘关系，研究结果支持中国东部鱼类具有双重来源性的观点。

23特定基因的标记

利用DNA分子水平上的变异作为遗传标记进行基因标记已成为可能。周开亚等用RAPD方法研究鉴别中华绒螯蟹种群，用200个随机引物对中华绒螯蟹辽河种群、长江种群和瓯江种群进行RAPD分析，其中引物HX01和HX02检测到瓯江种群和辽河种群所有样品共有HX01—04和HX02—07扩增片段；而长江种群样品的PCR反应中无这两个扩增片段出现，因而可作为长江种群的鉴别标记。未发现可区分瓯江种群和辽河种群的标记。谢浩等用RAPD方法研究三种绒螯蟹的亲缘关系，用引物OPO—05对25个中华绒螯蟹个体、27个日本绒螯蟹个体及12个日本绒螯蟹合浦亚种个体扩增，发现中华绒螯蟹所有个体都能扩增出一条大小约为1kb的区带，且相当明显和稳定，而其它两种在相同条件下仅有个别个体能扩增出相当微弱的区带。因此，可将这一区带作为一个遗传标记，用于鉴别中华绒螯蟹与日本绒螯蟹及其合浦亚种。

目前RAPD已广泛应用于鉴别、鉴定不同的生物种类。Johnson用RAPD技术鉴定了不同实验室品系的斑马鱼。薛国雄对长江、珠江、黑龙江三大水系的草鱼产卵场及太湖中捕捞的草鱼进行覆盖性的RAPD分析，结果表明每一水系的草鱼种群均有其特征性基因图谱，可作为种群鉴定的依据。夏德全等应用该技术检测了一个奥利亚罗非鱼养殖群体和湘湖，美国和沙市三个尼罗罗非鱼养殖群体，获得了鉴别尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼的分子遗传标记。姚纪花等利用20个随机引物对产于方正、彭泽和淇河地区的三个银鲫种群进行了RAPD检测，也获得了银鲫种群鉴定的分子标记。邓怀等对青鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼、鲫鱼、鲤鱼、团头鲂、胭脂鱼、土鲶和黄颡鱼进行了RAPD—PCR扩增。结果显示RAPD是一种非常灵敏的种间鉴定技术，特别是对鱼卵和鱼苗的鉴定有重要意义。郑光明等以池养的鲮、麦鲮为材料，提取血液基因组DNA，利用随机引物进行PCR扩增，通过缩短扩增时间和电泳时间，快速鉴定了三种不同的鲮鱼，并建立了一套DNA分子水平上的快速鉴定鱼种的方法。

24识别同一物种的性别差异

虾、蟹的性染色体没有统一的模式，用常规核型分析方法不能鉴别性染色体。通过RAPD技术可找出同一物种不同性别的基因组DNA特征性条带，从而有助于研究性别控制机制，也可为性别确定提供分子依据。邱涛用RAPD技术识别中华绒螯蟹的性别，200个引物中有17个引物扩增出群体水平的差异，其中一个引物(OPM14)扩增出个体水平的差异：雄性有一个800bP的特异带，而雌性没有。这可作为有价值的性别鉴别标记。

25监测遗传渗入，维持物种遗传多样性

目前，人为的养殖活动、人工放流等使得虾、蟹类种内不同种群间非自然的遗传渗入已相当普遍，应引起重视，需加以监测并收集数据，为保护种质资源、维持物种遗传多样性提供依据。李思发等用RAPD指纹标记研究中国大陆六水系绒整蟹的亲缘关系，引物OPP17扩增的947bP片段的出现频率，在长江、黄河、辽河三群体中显著地从南到北递减，长江蟹875%、黄河蟹4166%、辽河蟹1083%。这一遗传渗入的度量可作为区别三水系中华绒螯蟹的判据。邱涛等用RAPD方法研究中华绒螯蟹长江、辽河、瓯江水系三群体的遗传多样性，并未发现三群体间存在特征性条带，但群体间差异大于群体内差异。未发现群体间的分子遗传标记，但三群体间确实存在差异，表明近来种质资源混杂，遗传渗入是其中原因之一。

RAPD标记可用于群体遗传学研究，检测种群内、种群间的遗传多样性水平，并为种群识别提供可靠的遗传标记。Bardakci等用RAPD技术评估了罗非鱼的种群内、种群间的遗传变异度。Bielawski等进行了太平洋海岸条斑鲈的RAPD分析。Caccone等对欧洲尖吻鲈的DNA多态性进行RAPD—PCR分析。Garcia等尝试在斑节对虾中用RAPD分析不同地理群体间的遗传多态性，并就其在虾类选育中的应用作了初步探讨。王绕梅等用RAPD技术检测野生鲫鱼和四个金鱼代表种的基因组DNA多态性。张德春用该技术对湖北、广西两个鲢鱼人工养殖群体进行了遗传多样性的比较研究，为链鱼人工繁殖的科学规范提供一定的理论依据。张四明等进行了中华鲟随机扩增多态性DNA及遗传多样性研究，结果显示中华鲟天然群体核DNA水平的遗传多样性较低，从而为中华鲟资源的监测和保护提供了理论依据。石拓等用该技术对中国对虾朝鲜半岛西海岸群体的基因组DNA多态性进行了检测，表明该对虾群体的遗传多样性水平较低。宋林生等对日本对虾野生群体和养殖群体的遗传结构的RAPD标记进行了初步的研究，并认为将RAPD以及其他分子标记技术用于海洋动物的育苗育种中，进行标记辅助育种，是海洋动物增养殖健康发展的有力保证。

RAPD技术程序简单快捷，且无需事先确定目的基因的序列，无种属特异性，有无数的引物可供利用，能产生足够的多态性，无需同位索，可以鉴别物种之间和种群之间的基因组的差异，也可区分个体之间的差异。为此，许多从事水产育种工作的科研人员已把RAPD技术应用到水产遗传育种上，并已取得—定的成果。在海水鱼类(如大黄鱼等)、海水虾类的种质资源研究中，由于同工酶所揭示的种内水平上的遗传差异水平非常低，而RAPD比同工酶更能指示DNA多态性，因此RAPD分子标记在鱼类、虾类、蟹类种质资源遗传学研究中有着广泛的应用前景。目前RAPD分析主要应用于标记鉴定、遗传作图、系统发育和进化及亲缘关系的研究、种群的划分、群体遗传多样性研究等。但在实际应用中，RAPD也表现出不足，如显阳性位点，在后代中不能区别是纯合体还是杂合体；稳定性较差；高度的变异性等缺点。当然有些是可以避免的，解决的方法是对单链引物进行筛选，优化反应条件，但第一个缺点是无法避免的。如能把RAPD与其它分子标记如RFLP、AFLP和微卫星等结合使用，RAPD仍将会发挥更好的用途。总之，随着生物技术的不断发展和更多应用，RAPD技术也将更加完善，应用更加广泛。

RPAD特点与PCR相比，具有以下几个特点：①RAPD使用的是随机引物，不需要预先了解目的的基因和相应的序列。②操作简便，实验周期短，能在较短的时间筛选大量样品。③引物具有普遍适就性，适用于自动化操作分析。

与RFLP相比，具有以下特点：①RAPD分析只需要少量模板，一次扩增仅需20-100ng，这对于DNA量很少的材料进行基因组分析有利。比如对花粉粒、原生质体、种子等的DNA分析是切实可行的。②RAPD标记具有更大的随机性，亦有利于图谱的构建。对于DNA含量大的和多倍体物种，RFLP探针会与多倍体的多个片段杂交，所得到的混合指纹会对其它等位基因的阐明带来困难。而且由于DNA量较大，进行单拷贝的Southern杂交不很实际，至少需要很长的曝光时间，并且已知的探针数量有限。RAPD大大增加了可构建遗传图谱物种的数量。③无需借助于有伤害性的同位素，耗费的人力物力少。④灵敏度高。引物中的个别碱基的变化会引起扩增条带和强度的剧烈变化，这是RFLP所无法比拟的。⑤RAPD标记可以覆盖整个基因组，包括编码和非编码区，可以反映整个基因组的变化。⑥RAPD产物有大于50%的条带扩增于单拷贝区，经过克隆和序列分析后，可作为RFLP和原位杂交的探针，在基因定位、克隆及辅助选择育种中可以广泛应用。 RAPD是一种全新且有效的遗传标记，与其他分子标记相比，具有许多优越之处：

①合成一套引物，可用于不同生物基因组的分析。相对来说，RFLP标记具种族特异性，这限制了其应用。

②RAPD技术简便易行，省力省时。不需要RFLP分析的预备工作，如克隆制备、同位素标记、Southern印迹和分子杂交。并且RAPD检测灵敏方便，用荧光染料或同位素标记均可检测，这大大增加了其分析速度。即使用序列胶来分析RAPD，单独一人仅用36小时便能完成120个样品的分析，而RFLP至少要花一周时间。

③RAPD分析所需样品DNA量极少。仅为RFLP的1/1000～1/200，这对于生物早期取样鉴定或DNA受限制的情况大有益处。

④由于RAPD用于构建基因图谱时不需要克隆，这可打破克隆载体和宿主的限制，扩大了应用范围。

⑤每个RAPD标记相当于基因组分析中的靶序列位点，这对共同协作的研究项目，可简化信息的转移过程。

⑥RAPD标记可以对那些RFLP难以区分的基因组区域作出遗传连锁图。⑦RAPD分析能自动化，减少了象RFLP那样的麻烦手续。

然而，RAPD标记也存在某些不足。比如，RAPD标记难以区分开杂合子和纯合子基因型，不能有效的鉴别出杂合子。另外，RAPD反应易受外界因素影响，重复性不太令人满意，等等。因此，使RAPD实验条件标准化就很重要了。Black（1993）综述了一些影响条带的书目、大小和强度的因素，其中包括PCR缓冲液。dNTP和Mg2+浓度、循环参数（退火温度、变温时间、PCR仪）、Taq聚合酶来源（Schierwater和Ender，1993）、DNA条件和含量（Black等，1993）。 RAPD技术是由多种成分参加的生化反应，反应中各种成分均为微量，尽管其反应灵敏度高，但是影响因素较多，会出现重复性差等一些问题。为了得到较稳定的结果，各种反应参数必须事先优化选择，操作中每一步都必须小心谨慎，以防止出现差错。

温度 RAPD一般反应条件是：变性92-95℃，常用94℃，30-60s;延伸72℃，60-120s;退火35-37℃，30-60s。变性和延伸温度一般没有太大变化，而退火温度影响较大。退火温度低，引物和模板结合特异性较差，出现的条带可能增多;退火温度高，引物和模板结合特异性增加。有人提出，在寻找基因差异为目的的实验中，退火采用33-34℃效果更好。在优化方案中，退火温度可能要提高，以便降低背景，得到少而清晰的带。温度的梯度率也是十分重要的，特别是退火与延伸之间的梯度尤为重要。各种仪器的控温、升降温性能均有差别，一些仪器(如一些旧型号的仪器)在到达特定的温度前就开始计时，一些PCR仪显示的温度与实际温度会有差异。这些在设计程序和结果分析时有必要考虑，所以注明所用仪器的生产厂家、品牌、规格，就显得很有必要，对于同一批实验，注意控制在同样的温度条件下进行反应，结果才有可比性。

反应物的影响 PCR扩增受多种成分的制约，产物仅在部分循环中呈指数式(2)增长，逐渐将达到一个平台期，模板是关键制约因素之一，RAPD产物取决于此，实验中非常精确的模板浓度是十分关键的一个步骤。浓度过低，分子碰撞机率低，偶然性大，扩增产物不稳定;浓度过高，会增加非专一性扩增产物。更重要的是，若循环数控制不好，引物过早消耗完，后面循环中，PCR扩增产物的3端会和原模板及每一次循环的扩增产物退火，造成不等长度的延伸。因此，如果原模板浓度过高，非专一性扩增产物就足以形成背景，这是高浓度模板造成弥散型产物的原因。相对而言，模板纯度影响不大，即反应液中蛋白质、多糖、RNA等大分子物质影响不大。理想的模板和引物浓度能产生多态性丰富、强弱带分明的RAPD图谱。引物3端的重要性似乎更大。此外，Mg+2浓度也影响反应的参数包括产物的特异性和引物二聚体的形成，人们在各自的实验中得出不同的结论，大约在15-4mmol/L范围内。总之，各种反应物的浓度应事先进行筛选优化。

污染问题 实验中应设空白对照，因为引物、各种缓冲液和双蒸水都会造成污染。而且Taq酶也可能出现污染，给分析带来困难，所以必须设置对照以排除系统误差。并且，酶也尽可能优化。

扩增条带的取舍 重复性问题 为了克服RAPD重复性差的问题，应设置重复实验。作为DNA多态性标记位点的条带是应该可重复的，重复性好是最重要的取舍指标，而带的强弱不应该作为取舍的指标。有学者认为带的强弱与其在基因组中的拷贝数有关。但据Thormann对十字花科植物分析，RAPD产物的强弱与该产物在基因组中的拷贝数无直接关系，而与引物及模板的同源性程度有关。分析一个位点时，要作全面分析，若某一个体的全部带均弱，其模板可能有问题(浓度、分子量);若某一个体的大部分带与其它个体强度一致，仅有一条或少数几条带弱，可能存在拷贝数差异。重复性不好的弱带(无规律出现的带)可能由非专一性扩增、产物间退火或其它人为因素造成，不能记录。

异源双链问题 Ayliffe研究亚麻锈病菌时发现F1代中出现的一条带在亲本中没有出现，进一步研究发现这一条带是由2个等位基因组成的异源双链形成的，这2个等位基因除中间插入的38bp的序列外，其余序列相同。在蜜蜂的研究中也发现了相似的问题，这种条带可以用单链核酸酶将其消除。也可以将电泳温度提高到60℃以上，使异源双链变性，以消除其影响。

非孟德尔遗传的条带 Heun等分析认为，在显示多态性的非模糊条带中有925%的表现为孟德尔显性遗传，其余的条带不符合孟德尔遗传，分析认为可能由不同的序列组成。一般实验中大多采用符合孟德尔遗传的条带进行分析。在连锁图谱分析中，基因型错误可以部分消除，即在F1代或1：1混合物中没有出现的条带，在其父母本中应尽可能去掉。

同一条带的同源性问题 Thormann将RAPD产物标记作探针，杂交结果表明，与探针片断迁移率一致的带有时并不同源，这种情况仅发生在种间。并比较了RFLP和RAPD标记在种内和种间得出的结果，发现RFLP和RAPD标记在种内水平的结果完全吻合，但在种以上等级的结果相差甚远，这说明在电泳结果的同一个带中，有可能存在序列不同但分子量相同的几条带，RAPD无法检测。这种可能在种内较少发生，而这种间可能性较大，Castagna用RFLP和RAPD比较研究也得出了相同的结论。

电泳分辨率问题 电泳时，基因组不同位置的扩增产物共同移动的可能性是有的，即不同分子量的扩增产物可能在电泳时没有分开而形成一条带，凝胶分离系统和基因组的亲缘关系有可能提高这种概率。一般而言，聚丙烯酰胺和银染的分辨效果比琼脂糖和溴化乙铵要高，用较长(可达到20cm)或浓度更高(2%)的琼脂糖凝胶有助于提高分辨率。当然，随着分辨率和灵敏度的提高，更可能出现实验误差。所以有人评述：最保险而简单的方法是用琼脂糖电脉分离而且只注意那些无疑而重发性高的带。但是，聚丙烯酰胺和银染所揭示的高信息量的多态性无疑可加快分子标记的鉴定过程。

显性标记问题 RAPD标记来自于模板DNA的复制，经过30一40次循环，扩增条带数量理论上可达2。原模板中扩增位点是纯合还是杂合已无法判断，因为纯合位点的扩增条带只相当于杂合位点的2倍，电泳时无法检测到其差别。杂交中。如果亲本一方为纯合体，F1代就可以全部表现出该条带;如为杂合体，该条带在F1中应为l：l分离，即一半后代有该条带，而另一半则没有。当然来自于多拷贝区的条带分析更为复杂。

        2021年5月底，我又来了一场说走就走的旅行。从接到通知，到出行只有短短的三天时间。收拾心绪，准备简单的行囊，一路向东海之滨的福州而来。

        下了飞机之后，并没有想象中的湿润炎热，反而因是深夜，有一丝雨后的凉意。到达住宿地点时已是凌晨一点，一路奔波的疲劳终于释放了。

一、热与柔

        第二天一早，在院里漫步，许多从未见过的树高高低低的，大树高大挺直，叶子圆而又从中裂开，与同伴笑曰像“屁股”。小树低矮，开着小花，叶子新绿新绿的，很有生机。雨后的空气潮潮的，润润的，不一会儿身上就开始出汗。初步领教了福州的天气，不是火炉胜似火炉。

        第一次来到一座城市，我总是喜欢边走边看，街边小巷熙攘的人们各自忙碌着，生活的状态都写在脸上，写在或急迫或悠闲的动作中。市井生活充满了烟火气息，最抚凡人心。住处周边就是一条小街，路两边的房子年代很久远了，看上去老旧。清晨，小菜铺子里最忙碌，几样海鲜摆在店门口，常见的是蛤蜊和﨡子，还有新鲜的带鱼和虾。看着主妇们熟练地挑选着蛤蜊和﨡子，我可真是看不出怎样区分好坏的。偶尔看到挑着担卖螃蟹的，那螃蟹被粗略地捆扎着，青玉色，蟹肉鼓涨得仿佛要裂出来似的。

        傍晚时分，各家饭馆就热闹起来，大排档名副其实，简单的陈设，客人们来了点几道菜，就在喝酒划拳的喧闹声中开始了夜晚的生活。这里许多店铺都通宵营业，哪里都有勤劳的人。深夜了，那么小的店铺还在营业，很佩服这些努力生活的人。随着对闽南文化的了解加深，越来越发现，“爱拼才会赢”已是闽南人的精神内核。每一个独立的个体都是城市文化的星点汇集，一群拼搏的人兴旺了一座海滨城市，变成了今日富庶之城。

        深夜的福州是一座热闹的城市。而白天的福州，是一座名副其实古老的城市。

        这里是榕树的天下。到处都有榕树，满眼绿色，遮蔽阴凉。福州靠海临江，亚热带气候的温润环境，造就出一座榕树古城。街边的榕树没有一颗是年轻的，常见的有两人环抱的大树，弯曲的树干顺势生长，垂下长长的树须，看上去像沧桑老人。有的榕树斜着身子，把枝条伸向马路，默契地组成了林荫道。一颗一颗，独立而并不远离，静静地看着马路上行人车辆穿流而过，守护着这座城市。

        榕树的根系发达，随处都能攀延伸展，喜欢自由自在，无拘无束地生长。而城市里多了很多束缚，很多榕树的根部是方形的，看得出被框束过的痕迹。空气太潮湿，树干上苔藓多，层层的绿色，仿佛穿上了绿绒装。

      福州的雨是湿润柔软的。这里的雨随时随地会落下，没有任何征兆。早上还是雨停晨光，下午就猛然下起来了，就像雷公睡醒了午觉，拿起盆子随手泼洒一样，只听得“哗”的一声雨就大了起来。雨打在身上也是柔软的，不凉，也不急。雨中漫步很舒服。

二、鼓山灵秀

      下着小雨的周末，闲来无事登上鼓岭，当地人特别推荐来看看这里的风景。下雨天，上山的路弯弯曲曲，从市区出发走了近一个小时。站在柳杉王公园门口，周围再不见行人，一条小路两旁有几家民宿，公园大门口没有什么特别之处。走进公园，拾阶而上，远远看到一颗巨大的柳杉树，在我们的意识里应该还有更大的树王，于是没有过多停留就继续前行。再往上走，又是一条公路，两旁的民宿建筑风格大体相同，都是吃饭娱乐住宿。雨变大了，我们稍作修整，一路探寻，再也没有看到更大的柳杉树，却看到了更多的风景。柱里露营地，听风谷，鼓岭胜景，站在高山之上看风景，一览无余。北方的绿是苍翠的，南方的绿是葱绿而富有活力的。这样的绿山秀水怎么也看不够。

        走着走着，雨停了，渐渐开始有游人结伴上山了。我们沿着公路开始寻找更多的古迹，想象中的教堂已是翻修过的新式建筑，古砖古瓦里处处都是苔藓，一百年前的古老建筑而今已成为休闲娱乐区，房子不会说话，因为这里的主人早已不再是赏景人。

      沿山路而下，看到了无数不认得名称的花草，长在一片绿山中，为鼓岭增添美韵。大雨过后，大树是新绿的，花朵是鲜嫩的，一切都像是重新舒展了。

        大雨后的鼓岭，站在高处往下看，雾气渐渐升腾起来，一片朦胧。浓绿与浓雾相依相伴，浓雾飘来时天地一色，过一会了，绿树又显露出本色。

      一路探寻，想象中最大的柳杉树其实已经近在我们眼前。返回的路上，我们又一次回到柳杉王公园，走到柳杉王树的背后，才终于近距离受到震撼！一千三百年前的一颗小种子，如今已长成参天大树，根深叶茂，苍老而富有生命力。绕到侧面，大概是正面，看到了一座专为神树立的牌位，香火很旺。站在大树的枝叶覆盖下，渺小的人类一千多年的历史变迁都不足为道。此时，神圣的柳杉王树俯视众生，用千年的经历抚平世间万物，一切都是静止的，时间停止，心灵也是平静的。三毛说，如果有来生，愿做一棵树。许下愿，世俗的人不敢奢求，但愿来世静心伫立，今生也能如树般宽和容量。

      鼓山位于福州市东郊，闽江北岸，是福州市较出名的风景区。据说因峰顶有一巨石如鼓，每当风雨交加，便有簸荡之声，故名鼓山。鼓山一直都很受当地人的喜爱，是个爬山锻炼身体的好地方，山上的千年古刹涌泉寺也常年香火旺盛。

        周末，我们相约爬鼓山，距离住处几站地，坐地铁二号线很快就到了。来爬山的多是本地人，有老人，有孩子，我们也加入其中。走进鼓山的青砖道上，满眼都是绿色，树是绿的，草是绿的，砖地和砖缝里都是绿的。我们沿着绿地一路向山上缓缓而行。每走一段，都有小的凉亭，有些是古老的建筑，有些是新建的。

      石道旁的溪流在山脚下是干涸的，越往上就看到像蚯蚓似的一股细流缓缓流淌着。半山腰上一大片高低错落的石头上有水流的痕迹，每到下大雨时，这里就会出现瀑布。石头平滑的像被刀切过一样，经年累月的冲刷把石头磨刻成了石床。失去了棱角的石头饱添了柔和。

      到达鼓山顶，听说继续向上有座寺庙，我们又继续向前，一路上，山岩上的书法篆刻吸引了我们，边看边走，赞叹不已。进入涌泉寺，我们才真是发现了一片世外桃源，这里叫做喊水泉，一眼泉水从泉眼里不断涌出。一座古代修筑的龙嘴里源源不断地涌出清澈的泉水，古老又神奇。

      涌泉寺里，石道两边的书法石刻多极了，看得人眼花缭乱，目不暇接。最早的有宋代理学家朱熹题刻的字，近的有民国和现代人题刻的类似到此一游的文字，读起来非常有趣。石壁上的题刻字体不一，大小各异，内容有专门记事，有刻名留念，更多的是畅游山水有感而发。这里是古代书法艺术的天堂，让我们一群热爱书法的人留恋不舍，整整看了一个下午。

        涌泉寺是一座非常出名的寺院。院墙上贴着一张佛事安排，非常细致。旁边的斋堂里，桌椅整齐，每个人的碗洗净后就摆放在原处。斋堂里没有任何多余的装饰，在这里用饭心是净的。寺中烟火缭绕，走进来清心净气，拜佛烧香是世人的心愿。

      路上偶遇一个和尚，戴着眼镜，拿着新款手机，说话很温和。站在旁边观察，书生气十足，我们很想知道他是不是佛学院的学生，他笑了笑，没有否认，热心给我们指路后，转身甩着长袖走了，青衫长袖飘飘洒洒，带着点仙气。

        鼓山最高处海拔也只有几百米，向下眺望，闽江与另一条叫不上名字的江汇合在一起，蜿蜒曲折，远看江水跟黄河一样混浊。城市的高楼依水而建，平添了几分灵动。

三、平潭游海

        周末，我们租了两辆车去平潭岛游玩。一路高速，一个多小时就到了。跨海大桥特别长，海面上有很多大大小小的船，与远处隐现的海平面组成了一副特别美的海景图。

        跟着航标下到一个叫做大澳村的小岛，这里的石头房屋靠海修建，海风很强，吹来的海风咸咸的，很有力量。我们走到一户人家前，院门口堆满了网。这渔网很有特色，长长的尼龙线上穿着无数根黑色的橡胶条。一对父女正在把排列整齐的渔网平整地堆起来。看着堆好的渔网，再看看旁边散乱的渔网，足有上百米长，真不知这样复杂的整理工作是怎么细致完成的。这样的渔网是用来捕海蛎的，从断断续续的讲述中得知，这样的渔网下到海里后，海蛎就会依附在橡胶条上生活，等到成熟了就打捞上来。每年九十月下网，来年四五月收网。

        平潭是中国第五大岛，与台湾隔海相望。进入平潭，道路全是新的，街道绿化整齐干净，车辆和行人稀少，看上去很幽静，不像旅游城市那般热闹。我们先来到一处石头厝，一眼看去全是石头房屋，各家都装饰成不同风格，到处都是民宿，游人非常多。看蓝眼泪的季节过去了，我们下到一处沙滩看海，细软的沙子被小小的海浪一卷一卷的荡漾着，掬起的海水清澈微凉。踩水的乐趣不分年龄，大家都慢慢走着，感受海浪拍到腿上的凉爽和惬意。

        海水初体验之后，我们游览的兴致更浓了。接下来走到的海滩更大，一处海滩上全是沙蟹洞，小螃蟹们身形小，却非常机灵，听到一丁点动静就火速爬回洞里。有人试着挖开洞，钻了很深都没看到诶，看来，小沙蟹是个挖洞能手。沙蟹洞密密麻麻，它们勤劳地把潮湿的沙粒裹成一个一个的小圆球扔在洞口附近，看上去像无数颗沙珍珠散落。

        这里的海滩上时不时就能捡到贝壳，我们越找越深，赶着海水涨潮退潮的功夫捡，偶尔找到一个完整独特的贝壳都大声招呼伙伴们共同欣赏，仿佛找到的是个宝藏。

        来到第三片沙滩时，这里海边戏水的人又多又密，我们也踩着海水踏浪。天色渐沉，海浪不断向前延伸，每一浪海水都比前一浪更高，裤子已经绾到最高处，还是被打湿了。海浪看似温柔，实则狂野，涨潮开始了，傍晚的潮水一浪高过一浪，一层一层的海浪像头发卷一样，浪涌起时气势十足，待到消散时就变成了一串串美丽的水泡。

        平生第一次近距离看海，忍不住在海边来回地走，只为感受在大海辽阔无边的胸怀里，与海的亲密接触。在大海温柔有力的浪花里，洗涤内心的尘埃，换得片刻的宁静。

四、武夷风光

        周末，坐动车到武夷山风景区。这里的风景区游客常年不断，跟我们一路同行的还有四个在福州工作的台胞。起初有些担心，得知他们在福州工作，顿时放心了。

        武夷山最早有朱熹在此居住，从景区入口进去，一路的碧树茂盛如茵，抬头看山岭俊秀高耸，低下头溪流曲折，青绿润泽，溪流上的竹筏缓缓随水势流动，看上去真像一副带有色彩的水墨画。山坡之上有天然形成的石洞，里面阴暗潮凉，还放有石桌石凳。这样幽静之处，想象一下，若有人来拜访，还真是有朋自远方来，不亦乐乎啊。

        走到真正的山脚下，这里非常平坦开阔，后人将四面的巨石赋予传说故事，让看的人忍不住遐想。顺着石阶开始爬山的过程，依着陡峭的山势，一些台阶接近80度的直立，让爬山的人手脚并用才不会担心重心不稳掉下去。山其实并不高，但一山总有一山高。酷热的天气里没有一丝风，汗出了一层又一层，能够爬上山顶全靠意志力。欣慰的是半山腰看下去，山水画卷色彩更浓了，山水之美在于景，爬山之乐在于心，醉翁之意不在酒，在乎山水之间也。

      这里盛产岩茶，几百年前的大红袍母树跟想象中威武雄壮的样子一点也不一样，半山岩上，几颗看上去普普通通的树，就是稀世之珍，难以想象。

      晚上，我们去看了《印象大红袍》，说是舞台剧更准确些，把武夷山大红袍的前世今生诗意地表现出来。第一次在露天场地观看演出，声，光，电，影和真实的山水相连，场景转换巧妙而自然。雄秀高耸的武夷山大王峰和潺潺流动的九曲溪在灯光映衬之下无比瑰丽。足有上百人的观看席随着剧目的转场而移动，仿佛置身在一个幻象的空间里，人在景外，人又在景中。

      第二天一早，九曲溪漂流已排了长长的队伍。我们匆匆上竹筏，坐在厚实的竹椅之上开始了一段漂流之旅。溪水清绿，山色也是青绿的，静立的风景里欢快流动的是一艘艘竹筏。两位撑杆人一前一后，前面的竹筏翘起来半弯曲着，后面的竹筏平直，我们分两排坐在竹筏中间。竹筏全部用小腿粗的竹子制成，结实的材料看着很心安。溪水时而湍急，时而平缓，湍急处水流激荡起来，引起一片惊呼声，平缓时伸手划划水，再看着两岸青山胡乱想象，一群人自在其乐。

        下午来到一线天。国内很多景区都有这样由特殊地貌形成的景致，原本也没发挥太多想象。武夷山中的这一处是名副其实的一线天，两山之间只留有能容一人通过的缝隙，内室里气味难闻，抬头还可见蝙蝠飞行，让人心有余悸。拾阶而上，边走边感受着石缝之上聚集的雨水滴滴答答，掉落在身上，脸上。台阶很陡，越往上就成了手脚并用，墙壁摸起来湿滑油腻，行走时随着缝隙的狭窄变得呼吸有些急迫。水滴不断嘀嗒下来，越往上越密集，脚下却不敢快，倒不是怕摔倒，而是要侧着身子才能走过缝隙。等到终于能走出来了，才发现原来是下雨了，这一场难忘的一线天行走太难忘了。

        紧接着，武夷山给我们展示了一场瓢泼大雨，站在山洞下避雨，眼见着面前干涸的沟渠变成了一条水流丰满的小溪，一路向山下跑去。

        武夷山是一副天然的风景图，闯入其中的人只有片刻的停留，留下的只有陶醉和赞叹了。

五、鼓浪屿一瞥

        鼓浪屿是一座海上的小岛屿，游客密集，是一处热闹的网红景点。只有188平方米的海中小屿离2平米的小岛最低标准还差一点点，差之毫厘，却也因此形成了独特的风景。

      屿上常住居民不多，外来打工的人口超出了常住人口，日常出行都靠轮渡，很不方便，目前只有老人还留在这里生活，年轻人更向往外面的世界。

        鼓浪屿的街巷宽窄不一，据说有三百多条巷子，我们沿着历史遗迹一路边走边看，能看到的都是外观，内部是无法进入的。这里的房子都是石头砌成的，最高不过三层。旅游几百米长的防空洞把居住区和旅游区分割开来。旅游胜地早已商业化了，热闹的中心街是各种店铺，售卖食品的居多。行人匆匆，来此看景，看到的是城市化的商业店铺。

      中午时分天气炎热，沿屿长长的步道没有多少人，不是凭栏看海的时候。鼓浪屿十分注重环保，屿上只有三辆烧油车，我们碰到了一辆，是垃圾车。商家拉货全部是手拉平板车，还标记号码，管理很严格。

      我们中午到达，热的只想躲在阴凉下，鼓浪屿的景致看的匆匆，一拨一拨海水似的涌向鼓浪屿的游人，看到的景应该也是各不相同吧。看景不如听景，虽说请了导游讲解，最终还是一知半解。有时，看景看的是境，带着最美好的心态看眼前的山水草木，收获的是内心的悠闲自得。

        匆匆一别，不知何年再来，热情的鼓浪屿！

六、清源寻仙

      泉州的石雕很有名，这里是石刻之乡，路两边的雕刻作品琳琅满目，有十多米高的观音像，还有小件的各种石狮子。

        崇武古城里，雕刻作品随处可见，园中有金陵十二钗，历代名家等，海滩边还有眺望大海的唐僧师徒。展厅里的大师雕刻作品更是精细，引得我们一群人站在雕刻作品前思索如何雕出里外四层的效果来。

        崇武古城已有千年历史，海门胜景和气势恢宏的古城相融相伴，想象千百年来将士们守边戍疆，浴血奋战，今人凭吊，感慨良多。这里还是东海南海交界线，中央电视台的海洋天气就是据此检测数据，是很重要的地理标记。

        古城居民的生活如常，从门外看去，家家都有供奉。雨天石条路踩上去并不滑，窄窄的通道里，行人与电动车只能交错通行。看得出生活条件已改善了很多，门口的水磨石和瓷砖地面干净美观，只是还有一部分人家保留着木制的窗棂，狭窄幽暗，不敢随意窥探。

        小雨淅淅沥沥，我们一路奔向清源山。在山顶天湖景区下车，一路向山下行。独特的天湖形状像半月，石桥的一侧是深林，靠近高山的一侧就是天湖。湖水干净澄澈，湖中的锦鲤清晰可见，游到岸边才发现足有六七斤大。一湖一鱼守着天然的宁静。

        向山下走时，雨渐渐大起来了，为了尽快目睹老君山，我们选择了一条小路，谁知这一路遇到了很多没有路标的岔路口，时而上山，时而下山，行走的艰难和疲惫再加上艰难的选择，迷茫极了。边走心里边想，难道是今天心意不诚吗，怎么下山的路如此艰难。

        好在胜利终须磨难，一个多小时后，我们终于下山了。老君像高大祥和，背靠青山，眺望远方。远远看去，他的智慧无穷，笑意深邃。雕像时并无眼珠，然而老子目光炯炯，俯瞰世间万物，了然于胸。在思想家面前，普通人只有顶礼膜拜，愿无边智慧开散普惠，让更多人得智慧，明白人生奥义，过好平凡岁月。

        站在老君面前，《道德经》一句也想不起来，真是汗颜。广场前方有赵孟頫书写的《道德经》全文，镌刻在方方正正的石碑上。书法大家赵孟頫的字体苍劲豪迈，端正有力。来到福州，感慨读书太少，对书法篆刻研究太少，每到一处，只看到了景，背后的历史和文学渊源大多并不知晓。这样的游览观赏也算是打开一扇门，加深了对历史文化的了解。

      弘一法师在清源山圆寂，此地建有舍利塔，读他的生平，对大师这一生的经历，后辈无法评说，只愿修行圆满的大师在这仙山中静眠。

      一日寻仙，清源山高林茂，环境清幽，山水俱为一色。一直在思索，古人修行，在如此山幽水静之地，人与山水同在，应该是易得开悟。然而，有此修炼之心，终年远离人间烟火，已是仙人之修为了。平凡人偶尔寻仙，有志人终生修炼。

七、闽南美食

      游在闽南，必然吃在闽南。街边小店林立，这里是市井小吃的世界。闽南人常吃的捞化，锅边，海蛎饼等等，第一周就迫不及待的尝试了。海鲜是真的鲜，滋味还不适应。胃是有记忆的，西北人的胃对海鲜虽没有抵抗力，不过无辣不欢确是很难看到了。这里的饭食很清淡，口味偏甜些，名菜荔枝肉就是一道典型的甜食。

        原本我是对猪肉不太感冒的，来到这里，变成主食以后，笋肉包，烧麦，肉燕，排骨汤，怎么做都口感好吃。尤其是排骨汤，加些玉米，汤口清香甘甜，汤色也是清淡的，再配上几颗干贝，很美味。

        肉燕和鱼丸是闽南小吃最常见的，这里海产丰富，鱼丸鲜柔，肉燕鲜香脆爽，怎么吃都不会腻。本地人平常会用一碗肉燕或者鱼丸汤，配一份拌面，边喝汤边吃面。没有搭配尝试的原因是，没有任何佐料的面跟北方的面食差异太大，所以，走进店里，每次都安心地喝汤。

        海边城市最丰富的就是海鲜。原本计划买海鲜自己做，没有达成计划，最终在一次聚会中实现了，在本地一家有名的海鲜店。餐前先来一碗粉丝老鸭汤。海鲜品种很多，涮海鲜还是第一次尝试，底料就是一锅清水，涮各种海鲜，味道鲜美极了。在家乡那座内陆城市吃海鲜吃的是一顿较有档次的饭，在海滨城市吃海鲜吃的是新鲜美味，滋味久久不能忘怀。

        写在最后：

        一次远行是难忘的记忆，写下来留在文字中，每次翻开总会回忆起一起游历的景与人。酷暑和暴雨都不曾善待想要看景的人，当时的懊恼和种种狼狈，经历时间的沉淀会变成情景交融的体验。亲身经历过，留下的只有当时当刻的感受。看遍山水，终会回到熟悉的地方。此心安处是吾乡。

在虾多的水域，钓鱼容易受虾的干扰。在这种情况。钓钓虾子也是很有趣味的。钓虾又分为纯属出于爱好钓虾和专业钓虾。

　　一、爱好钓虾技巧

　　虾子不能吞食带钓饵的鱼钩，只能用两只大螯把鱼钩或钓线钳住，吮尝和吞食钓饵。如果钓鱼时，发现虾子来捣乱，提钩动作柔和一些，把鱼钩慢慢拉近水面，在将近出水面时动作快一些，也可以把它拉上来。不过，有时它的大螯一松，又很容易掉回水里。专门钓虾，不能采取这个办法。

　　二、专业钓虾技巧

　　钓虾子，最好不用浮子。要用小鱼钩、小钓竿、短钓线，一线多钩。鱼钩用并列式的系法，还可以稍有高低。用蚯蚓作钓饵。也可以不用鱼钩，像钓胡子鲶那样，，把蚯蚓串起来扎成一坨作钓饵，另外准备一具带有长把的小捞网。

　　准备就绪以后，选择虾多的水域，先把捞网沉到水的面层，然后把鱼钩或钓饵下到水的上层，手持钓竿感到有虾子拖拉钓饵队就便馒地上促到水的面层，再往捞网里拉。当钓饵和虾子进了捞网以后，把捞网提起来。如此局面复始，连续作业，就可以钓上很多虾子。

1、使用捕虾笼的捕虾方法,属于捕虾方法。诱饵:野杂鱼粉30克、泥鳅粉30克、鲜鸡血粉35克、植物青味源粉60克、鱼腥香粉45克、膨化粉35克、味精15克、促食剂粉55克、阿魏50克、动物骨粉70克;按比例取上述物质,分别放入烘干机中,烘干、粉碎成颗粒，混合。

2、地笼选用直径6毫米的钢筋，加工制成40厘米的正方形框架，每50厘米为一节，用钢绳连接起来，外面再用聚乙烯网布包缠，网的两端或中间制成网兜。每节设一个进口,框架与框架的网片上做成须门,使虾只能进不能出。

3、每相连两节的进虾口方向相反,这样可捕来自两个方向的鱼虾。地笼的长度可依据养殖水面的长度、宽度而定,一般为15节左右,总长约7～8米。地笼是定置渔具,可以常年捕捞。将地笼置于池塘、湖泊、河沟等养殖水面或天然水域中,每天早晨倒出网兜中的鱼、虾,取大放小。

4、将诱饵穿在捕虾笼内的诱饵柱，将取虾门关好，然后放入在虾集聚的水域，虾受诱饵香味的吸引，从捕虾笼的倒须口进入捕虾笼内吃食，倒须口的出口是漏斗状的，进入端口大底端口小，虾很难再找到倒须口底端的小口，虾即无法再从倒须口出去,将捕虾笼提出水面，打开取虾门，捕虾笼内的虾全部被捉。