蚕丝蛋白的提取工艺

1蚕种场削口茧及下脚丝一丝素蛋白一水解一过滤提纯一滤液pH测试调整一浓缩一灭菌一成品。

①削口茧、下脚丝去杂脱胶：即把蚕种场制种的削口茧壳内的脱皮或缫丝厂的下脚丝中的杂质剔除，然后在一定浓度的弱碱溶液中煮沸半小时，取出茧丝用水漂洗几次拧干(脱胶)。

②水解：严格控制反应的温度、浴比、时间、溶剂浓度等条件，掌握至多肽的形式终止水解。

③过滤提纯：滤去没有完全水解的固体物质及杂质。

④pH调整：用pH调节剂调整pH在6．5~7．0左右。

⑤浓缩：把pH调整后的水解液上柱在薄膜浓缩器上进行浓缩。

⑥灭菌：(浓缩后的水解蛋白液如在食品上应用用酶制剂继续酶解，控制分子量在300~800左右中止，然后灭菌。)加入微量防腐剂，以防霉菌的滋生。

2．蚕丝蛋白丝素肽产品技术、质量指标

丝素肽又名丝多缩氨酸(SILK Polypeplide)，其多肽键的基本结构为　其中Rl、R2……R。为氨基酸侧基。　丝素肽含有十七种氨基酸，其中人体所需的氨基酸几乎具备，特别是人体皮肤、毛发十分需要的营养氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、酪氨酸)其含量占到氨基酸总量的80%以上，这是其他水解蛋白所不可及的。

21技术指标：①外观形状：淡**透明液体，无特异气味，易溶于水。②双缩脲反应为阳性，紫外吸收光谱在波长200~240nm处有强吸收峰。③pH值6～7。④比重(d 2。o)1．000~1．050。⑨蛋白质含量：>/14%。⑥氨基酸：共17种，每ml中含87mg以上。⑦灰分：1%以下。⑧重金属汞、砷、铅分别在1ppm以下。⑨细菌总数(个/m1)≤10。⑩粪大肠杆菌、绿脓杆菌、金**葡萄球菌均不得检出。

22质量指标：丝素肽是由天然蚕丝经特殊工艺提取而成，因此，氨基酸组成与含量是衡量产品质量的重要指标之一；而丝素肽分子量的大小与护肤功效的发挥又有着密切的联系 [编辑本段]丝素蛋白材料改性的研究进展　丝素蛋白是一种从蚕丝中提取的蛋白质，具有很好的生物相容性，能制备成膜、凝胶、微胶囊等多种形态的材料，由于它独特的理化性能，目前丝素蛋白材料在生物医学材料领域被广泛的研究，如固定化酶材料、细胞培养基质、药物缓释剂、人工器官等等。为了提高丝素蛋白的性能，使其更好地应用于生物材料领域，近年来，国内外学者通过不同方法对丝素蛋白进行了化学修饰，取得了一些新的研究成果。本文概述了丝素蛋白材料改性在提高丝素蛋白材料的力学性能、热稳定性等理化性质；改变丝素蛋白材料对药物的释放速度；赋予丝素蛋白材料抗血凝性、对细胞生长的调控性等方面的研究报道。 丝素膜是被研究得最早和最深入的丝素材料，它是由丝素溶液干燥而得。经不溶化处理后的丝素膜脆性，是丝素膜的最大缺点。造成不溶化处理后的丝素膜脆性的主要原因是：丝素蛋白质大分子肽链上的肽键—CO—NH—中的C—N的键长为0132nm，比C—N单键的键长0147nm要短一点，比C=N双键的键长0127nm要长些，使肽链具有部分双键的性质，刚性较大，影响了丝素蛋白质大分子主链的柔顺性。在经不溶化处理过程中，丝素蛋白的结构会发生从任意卷曲到β结构的转变。在丝素蛋白发生结构转变后，侧链与侧链间、侧链与主链间以及分子与分子之间可形成大量的氢键结合，产生大量的次级交联点,使丝素蛋白质大分子更难以运动，致使丝素膜的柔软性、伸长和弹性都较差。不少研究通过共混、接枝、交联等方法，以提高和改良丝素膜的力学性能。

11共混改性

Freddi等曾报道过丝素蛋白/纤维素共混膜的性能。纤维素的加入可以有效地改变共混膜的力学性能。拉伸断裂强度随着纤维素的含量从20%起呈线性增加，断裂伸长率则在20%～40%间急速增加，而后趋于缓和。含40%纤维素共混膜的柔韧度大约是纯丝素膜的10倍。共混膜柔韧度的提高由多种因素促成，如纤维素的力学性能的影响；共混膜的吸湿性纯丝素膜强，含水率的提高有利于丝素膜的柔韧度提高；相邻丝素蛋白链和纤维素链在无定形区内的相互作用产生的影响等。

李明忠等曾报道过关于丝素/聚氨酯共混膜的力学性能的研究。结果表明，随着聚氨酯所占比例的提高，丝素/聚氨酯共混膜的断裂伸长率明显增大；当聚氨酯所占比例大于40%时，断裂伸长率增长速度明显加快。当共混比例为50∶50时，断裂伸长率从602%提高到2262%。聚氨酯阻止了丝素蛋白质大分子链段间产生过多的氢键结合，降低了丝素的结晶度，增加了可自由伸展链段，加上聚氨酯主链本身具备很好的柔顺性，所以共混膜的柔软性、弹性明显比纯丝素膜好。

最近，美国学者也曾做过这方面的实验。聚乙烯氧化物（PEO）是一种具有很好生物相容性的聚合体。他们在高浓缩的丝素溶液（8%）中加入不同比例的PEO溶液制成共混膜，发现加入2%的PEO可以提高膜的强度，而在其他浓度下膜的强度则降低。这种现象可以用相分离来解释。PEO和丝素蛋白两种聚合体发生相分离，阻止了丝素蛋白相内的相互作用。

当PEO含量达40%时，共混膜的断裂伸长率可从原来的19%增加到109%，因此，PEO的加入有助于丝素蛋白柔韧性的提高。另外，研究还发现PEO能方便地从共混膜上萃取，因此，很容易控制膜的多孔性和表面粗糙程度。

王朝霞等人研究了丝素/聚乙烯基吡咯烷酮（PVP）共混膜的制备方法和性能。结果表明，PVP与丝素蛋白共混后，可使共混膜增加伸长率、吸湿性以及透气性，改善了丝素创面保护膜的性能和应用效果。共混膜的强度随PVP含量的增加而有所降低。这是因为PVP是完全非晶态结构，其分子呈无规卷曲状，故PVP的加入使共混膜的强度降低。共混膜的伸长率开始随PVP的比例增加而下降，PVP/SF为2∶8时，伸长率较小，只有13%左右。而后伸长率又逐渐提高。PVP/SF为3∶7左右时，伸长率最大，可达18%以上。

关于丝素共混膜的研究还有丝素蛋白/海藻酸钠共混膜[5]，丝素/明胶[6]等等，都不同程度地增强了丝素膜的强度和弹性。

12化学接枝改性

20世纪80～90年代，开展了较多的对丝素蛋白的接枝改性研究。刘剑洪等曾用四价铈盐作引发剂，引发丝素蛋白纤维接枝紫外吸收剂——2-羟基-4-丙烯酰氧二苯酮（HAOBP），虽然改善了丝素蛋白纤维的紫外稳定性能，且力学性能却大幅度地下降[7]。为了解决这一问题，刘剑洪继续采用“无引发剂聚合”法在丝素蛋白纤维表面接枝HAOBP的可行性。结果发现，这种接枝聚合方法是一种更为有效的改性方法。接枝06%HAOBP的丝素蛋白纤维，其热稳定性及紫外稳定性均得到了显著的改善，但力学性能没有下降。

Tsukada等曾研究了甲基丙烯腈接枝丝素纤维后物理性能的改变。结果表明，随着接枝物甲基丙烯腈的加入，丝素纤维的拉伸模量有所降低，这说明了接枝反应使得丝素纤维变得更加柔软且有弹性。

除了家蚕丝的化学接枝外，还有其他蚕丝的接枝共聚。Tsukada等研究了酸酐对柞蚕丝的化学修饰。柞蚕丝经LiSCN预处理后，与酸酐发生酰胺化反应。有意思的是，无论LiSCN预处理还是酰胺化修饰，共聚物的物理性能和热行为几乎没有发生变化，但是预处理后含水率有所增加，而酰胺化修饰后含水率却线性下降。柞蚕丝的这些性能为聚合反应提供较宽的适用范围，使得柞蚕丝很可能成为一种生物材料。

13化学交联　卢神州等以环氧氯丙烷和聚乙二醇（PEG）为原料，在碱性催化下反应得到聚乙二醇缩水甘油醚（PEGO），作为制备丝素蛋白膜的交联剂。随PEG含量的增加，膜的拉伸断裂强度和杨氏模量减小，断裂伸长率增大、机械性能比纯丝素膜有了明显的提高 。　闵思佳等发现用二缩水甘油基乙醚作为交联剂所制备的丝素蛋白质凝胶（CFG）具有良好的强度和柔韧性。根据制作条件可达压缩强度大于100g/mm2,压缩变形率大于60%。另外，材料的力学强度跟丝素水溶液的浓度有关。4%（wt）的丝素蛋白质水溶液的各种凝胶的强度和变形率均小于7%（wt）浓度的各种凝胶。这是因为丝素蛋白质浓度低时，形成的三维网目的结合点稀疏，因此，凝胶强度较低。要得到高强度CFG，除了合适的交联剂等外，还需有合适的丝素水溶液浓度。 闵思佳等曾测试了酰胺化修饰丝素材料对离子型化合物的吸附释放性能的影响。结果表明：经修饰后丝素蛋白质的等电点为pH=6左右，而天然的为pH=4左右；与未修饰相比，经修饰的丝素膜对阳离子化合物的吸附量减少，对阴离子化合物的吸附量增加，而且经修饰的多孔丝素材料对阳离子化合物的释放量增加，对阴离子化合物的释放量则明显降低。因此，认为用羧基酰胺化修饰的方法，可在一定程度上改变丝素材料对离子型化合物的吸收释放性能。

另外，用甲壳素交联丝素蛋白膜可以获得半渗透聚合体网状物，对离子和pH具有很好的敏感性，被期望用作人工肌腱。有人曾用含有磁小体的交联壳聚糖丝素膜作为药物缓释材料来调控5-氟尿嘧啶药物释放情况和磁反应特性。结果表明，交联壳聚糖丝素膜的释放程度和诱捕效率比纯甲壳素微球体要好得多，5-氟的释放程度随着交联剂戊二醛浓度的增加而降低。 异丁烯酰基丙烯酰基磷酸胆碱（MPC）是一种新合成的磷酸胆碱聚合物。在没有抗凝血剂的条件下，也能有效地阻止血凝的发生。把MPC聚合物接枝到丝素蛋白分子链上，可以很好地观察到接枝物的抗血凝性。Furuzono等通过异丁烯酰基丙烯酰基异氰酸酯（MOI）使丝素蛋白和MPC聚合体相互接枝。通过测定血小板在MPC-SF上的粘附能力，与原始丝素SF相比，血小板粘附量有了明显的减少。由此可以得出，经MPC修饰后的丝素材料的抗血凝性有所提高[17]。

此外，硫化丝素也具有很好的抗血凝性。它是通过丝素蛋白与硫酸或氯代硫酸在嘧啶溶液下反应所得。硫化后的丝素能延长血液凝固时间，并且随着硫酸基团的增加，抗血凝性也有了明显的提高。 丝素材料具有良好的生物相容性，可以用来做细胞培养基质。为了增强丝素蛋白材料的功能，如更强的抗菌抑菌性，调控细胞生长速度等，一些研究尝试了化学改性的方法。

51丝素/低聚糖接枝物

N-乙炔-壳聚寡糖（NACOS）含有6个以上的单糖单元，具有很强的抗菌性和抗肿瘤性。将其接枝到丝素蛋白上后，并在06%壳聚寡糖/丝素接枝物（NACOS-SF）上培养大肠杆菌24h后发现，此接枝物上大肠杆菌的细胞数目并没有明显的增加，这就是低聚寡糖（COS）发挥了作用。因此，NACOS-SF可以起到抗菌抑菌的效果。

最近，Gotoh等报道了关于乳糖/丝素接枝物作为肝细胞粘附支架材料的研究。他们利用氰尿酰氯（CY）把乳糖接枝到丝素蛋白主链上，所得溶液制成膜，在其上培养肝细胞，结果发现细胞粘附能力是纯丝素膜的8倍，与胶原相当；培养2d后，涂有接枝物的肝细胞形成的单层与胶原相比稍显圆滑和集中，更有利于肝细胞的培养。

52丝素/聚合体接枝物

为评估材料的亲水性，Gotoh等分别测定了聚乙二醇/丝素接枝物（PEG-SF）和丝素（SF）的水分含量和接触角。结果发现，PEG-SF含水率达380%，而SF只有32%。这也说明了亲水性PEG链接枝到丝素链上后，增加了水分含量，从而提高了丝素材料的亲水性。

亲水性的提高，可以带来其他性能的改变。Gotoh等以PEG-SF作细胞培养基质，与SF对照，比较细胞的生长率。结果显示，随着时间的推移，SF上的培养细胞个数有了明显的增加，而PEG-SF则几乎没有变化。从PEG-SF对细胞的低吸附性和低生长率上可以得出，PEG-SF可以调控细胞粘附的数量和生长速度。

经聚乳酸表面修饰过的丝素蛋白能够提高造骨细胞与修饰后的膜之间的交互作用，促进细胞粘附和增值。

相类似的还有通过对精氨酸化学修饰，来影响对纤维原细胞的附着能力。 丝素蛋白材料具有良好的生物相容性，在生物医用材料领域的应用前景甚广。但是，纯丝素蛋白材料的力学性能等尚未达到实用性的要求，而改性的研究是一种良好的途径。

2014年11月20日，西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室通过敲除Fib-H基因获得空丝腺，蚕宝宝吐出人工合成蚕丝蛋白，人们或许可以穿上人工合成蚕丝做的衣服。

先用汽油或四氯化碳洗，有颜色的油渍可先用酒精洗。

桑蚕丝，就是桑蚕结的茧里抽出的蚕丝，这种蚕丝，由两根呈三角形或半椭圆形的丝素外包丝胶组成，横截面呈椭圆形。

蚕丝纤维为蛋白质纤维，丝胶和丝素是其主要组成部分，其中丝素约占3/4，丝胶约占1/4。其色泽白里带黄，手感细腻光滑。

蚕丝纤维由两根呈三角形或半椭圆形的丝素外包丝胶组成，横截面呈椭圆形。

蚕丝纤维为蛋白质纤维，丝胶和丝素是其主要组成部分，其中丝素约占3/4，丝胶约占1/4。

丝胶和丝素由18种氨基酸组成，约含97%的纯蛋白质。丝胶是水溶性较好的的球状蛋白质，将蚕丝溶解于热水中脱胶精练，就是利用了丝胶的这一特性。由于丝胶和丝素的氨基酸组成不同，丝素为纤蛋白，丝胶为球蛋白。

桑蚕所吐之丝全长可达1000米以上。

以桑蚕丝为原料，将若干根茧丝抱合胶着缫制而成的长丝，又称真丝。机器缫制的丝称为厂丝，白茧缫的丝称为白厂丝。用简易机械和工艺，以次茧为原料缫制的丝称为土丝。经精练脱胶后的丝，称为熟丝。

而未精练的丝，则叫作生丝。由于桑蚕丝从栽桑养蚕至缫丝织绸的生产过程中未受到污染，因此是世界推崇的绿色产品。又因其为蛋白质纤维，属多孔性物质，透气性好，吸湿性极佳，而被世人誉为“纤维皇后”。

两个影响。丝纤维织物的脱胶是精炼的主要内容。蚕丝的构成包括丝胶与丝素，其目的是去除包裹在其外层的丝胶、蜡脂、色素等。练丝是指未经染色的熟丝。温度对其清洗工艺主要有两个影响。

1、温度会影响脱胶后丝纤维的韧性，温度高热韧性低，温度低韧性高。

2、温度会影响练丝后的颜色变化，温度高颜色就会偏向于暖色调，温度低颜色就会较为冷色调。