卵巢卵泡发育的分离方法对移植卵巢卵泡发育的影响实验

目的

评估机械法、酶解法和酶解机械结合法等分离方法对小鼠移植卵巢分离卵泡的发育及其生殖潜能的影响，建立更好的卵泡分离技术方案。

方法B6D2F1新生小鼠卵巢移植后分别用机械法、长时酶解法、短时酶解法或酶解机械结合法分离卵巢组织中的腔前卵泡，分离回收卵泡在体外培养12 d时加入绒毛膜促性腺激素(hCG)处理26 h，收获卵丘复合体进行体外受精。

结果机械法的卵泡回收量、卵泡培养残存率、排卵率均高于酶解法，短时酶解法的排卵率高于长时酶解法;酶解机械结合法的平均卵泡回收量、平均排卵数、卵母细胞成熟率等多项指标均高于其他各组。

结论酶解机械结合法是分离小鼠卵泡良好的技术方案。

卵巢 卵泡 卵母细胞 培养技术 胚胎组织移植

人工诱导胚胎卵巢原始卵泡发育成熟可为受精机制研究和医疗性克隆提供充足的卵母细胞源。对异体移植发育到一定程度的卵巢进行生长卵泡分离是人工诱导卵泡发育的关键步骤之一[13]，迄今已经发展出两种卵泡分离技术，包括酶解分离法和机械分离法。这两种方法各有其缺点，使每个卵巢的卵泡回收率和成熟率均停留于较低水平。本研究探讨了酶解法、机械法和酶解机械结合法等分离方法对小鼠移植卵巢分离卵泡的发育及其生殖潜能的影响，以期建立更好的卵泡分离技术方案。 11 动物 C57BL/6(B6)雌鼠、DBA/2(D2)雄鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司[合格证：SCXK(沪)2007005]，以B6雌鼠和D2雄鼠交配繁殖B6D2F1(F1)小鼠。小鼠饲养于恒温(25 ℃)动物房单笼独立通风系统(IVCII型，苏州市冯氏实验动物设备有限公司)，光照14 h，黑暗10 h，自由饮水取食。

12 试剂 αMEMHEPES(42360032)，αMEM(32571036)，胶原酶I(17100017)，脱氧核糖核酸酶(DNaseI，18047019)及ITS(胰岛素转铁蛋白硒混合物)均为美国Gibco公司产品; rFSH(注射用重组人促卵泡激素，瑞士Serono公司);LH(黄体生成素，美国Sigma公司);hCG(中国丽珠集团丽珠制药厂);FCS(胎牛血清)，penicillin/streptomycin(青霉素/链霉素)及KSOM+AA(MR106D)均为美国Chemicon公司产品。

13 卵巢移植 B6雌鼠(8～10周龄)与D2雄鼠(10周龄)4∶1合笼培育F1代，次日查到阴栓者记为E05 d;以20 d为孕期，预产期前3 d每日早晚查看孕鼠是否生产;断颈处死新生12 h以内F1小鼠，取出双侧卵巢待移植。异戊巴比妥(15 mg/mL)麻醉成年(8～10周)F1雌鼠(移植受体)。消毒小鼠背部，在肋脊角区做纵向切口进入腹腔，切除双侧卵巢，然后在左侧肾被膜下植入新生小鼠卵巢2枚，层层缝合伤口。待受体鼠清醒后送回鼠舍。

14 卵泡分离 新生小鼠卵巢移植14 d后，将受体鼠断颈处死，从肾被膜下取出移植的卵巢，卵巢移植物约2 mm大小，表面可见丰富的重构血管，在体视镜下可清晰观察到卵巢移植物中的卵泡。用1 mL注射器(320310，美国BD公司)的针尖将每枚卵巢均匀横切为2块，4块卵巢组织混合后随机分组进行分离。

141 A组(单纯机械法) 将卵巢组织块转移至卵泡分离操作液(αMEMHEPES，10%FCS，100 IU/mL penicillin，100 mg/mL streptomycin，不含胶原酶和DNA酶)中，在带有37 ℃恒温热盘(MATSU55SZX2A，奥林巴斯)的体视显微镜下，用精细尖镊 (直5#，T1181，中国淮安特申医疗器械有限公司)剥离卵巢中的卵泡。每隔5 min，即将已剥离的完整卵泡转移至事先装有1 mL卵泡培养液(αMEM，5%FCS，01 IU/mL FSH，001 IU/mL LH，1%ITS)的35 mm培养皿中。共分离4次，总时间约20 min。

142 B组(长时酶解法) 将卵巢组织块用1 mL注射器针尖均切为3小块，置于500 μL卵泡酶解液(αMEMHEPES，3 mg/mL胶原酶I，1 mg/mL DNase I)中，在37 ℃、体积分数为005的CO2培养箱中消化20 min，第20分钟时将其从培养箱取出，用200 μL移液枪吹吸消化液30次。在体视显微镜下将游离出的结构完整的卵泡转移至事先装有1 mL卵泡培养液的35 mm培养皿中。

143 C组(短时酶解法) 将卵巢组织块用1 mL注射器针尖均切为3块，置于500 μL卵泡酶解液中，在37 ℃、体积分数为005的CO2培养箱中消化，每隔5 min即从培养箱中将组织取出，用200 μL移液枪吹吸消化液30次，在体视显微镜下观察是否有游离的卵泡，如有则将卵泡迅速转移至装有1 mL新鲜培养液的35 mm培养皿中。共消化20 min。

144 D组(结合法) 将卵巢组织块用1 mL注射器针尖均切成3块，转移至500 μL卵泡酶解液中，在37 ℃、体积分数为005的CO2培养箱中消化5 min。然后在带有37 ℃恒温热盘的体视显微镜下，在卵泡酶解液中用精细尖镊分离卵泡。每分离5 min，即将已分离得到的完整的卵泡转移至事先装有1 mL卵泡培养液的35 mm培养皿中。共分离4次，20 min。

15 双荧光染色 每组随机选取部分分离卵泡，放入Calcein AM(4 mmol/L，Sigma，C1359)和Ethidium HomodimerI(10 mmol/L，Sigma，E1903)混合液中，37 ℃、体积分数为005的CO2培养箱中培养45 min;卵泡悬液置倒置荧光显微镜观察，在蓝光的激发下，活的卵泡发绿色荧光，死的卵泡发红色荧光，分别计数死、活卵泡数。

16 卵泡体外培养 各组分离所得卵泡分别进行体外培养12 d。第0天，分离得到的卵泡培养在加有1 mL培养液的35 mm培养皿中;第1天，加入1 mL新鲜培养液;此后每天半量换液;第12天全量换为卵泡成熟培养液(αMEM，5%FCS，01 IU/mL FSH，001 IU/mL LH，1% ITS，15 IU/mL hCG);第13天，在加入卵泡成熟培养液后26 h收集排出的卵丘复合体(OGCs)。

17 体外受精 每组的OGCs分别行体外受精。卵母细胞受精培养4 h后从受精滴中洗出，转移至预先平衡过的KSOM+AA的小液滴中培养。观察卵母细胞的成熟率(以含有第一极体的卵母细胞百分率代表)、受精率(以双原核卵母细胞占有第一极体卵母细胞的百分率代表)。

18 统计学处理 采用SPSS 115软分析。4组的卵泡存活率、培养卵泡各阶段成熟率、排卵率运用单因素方差分析(one way ANOVA)，各组均数以最小显著差法(least significant difference, LSD)进行两两比较和显著性检验;卵母细胞成熟率和受精率采用χ2 检验。 21 分离卵泡回收量 经过分离操作后，显微镜下可见大量腔前卵泡，大部分卵泡呈圆或椭圆形，边界清楚，部分卵泡外周附有或多或少的卵巢间质组织，卵母细胞成圆形，位于卵泡中央，透明带清晰可见(图1A)。体视镜下回收卵泡边界清晰、光滑的卵泡，计数各组回收卵泡量(表1)。表1 各组卵泡回收量比较

22 双荧光染色结果 卵泡双荧光染色后，在蓝光的激发下，活细胞显示绿色荧光，死亡细胞则呈红色荧光。将卵母细胞呈绿色、卵泡细胞≥70%呈绿色者视为存活卵泡(图1B)。各组活卵泡的百分率见表2。表2 各组卵泡存活率比较

23 卵泡体外培养结果 每组卵泡在相同条件下培养12 d，计数5、12 d的卵泡残存率;在加入hCG 26 h后，计数排卵率。各组各项指标的结果见表3。表3 各组卵泡体外培养结果比较

24 体外受精结果 各组收获OGCs分别受精，获能精子密度控制在5×105 mL1。早期胚置于KSOM+AA中培养，卵的密度为每20 μL含 15个。成熟率及受精率的计数结果见表4。D组成熟率高于其他3组，余3组之间差别无统计学意义;受精率4个组之间无差别。表4 各组体外成熟与受精结果比较 近年来，多种哺乳动物，如小鼠、兔、猪及人的卵泡诱导发育技术体系都获得了很大进展[47]。在这些体系中，大多倾向于将卵巢中的卵泡单独分离出来后再进行培养。有报道表明，分离卵泡只有其基底膜未受损伤并带有少量间质细胞、未成熟圆形卵母细胞位于其中央时，体外培养才能成功[8]。迄今常用的卵泡分离方法有两种，包括利用水解酶(如链霉蛋白酶、胶原蛋白酶和脱氧核糖核酸酶)消化卵巢的结缔组织而获得游离卵泡的酶解法和用锐利器械剥离出卵泡的机械法[6,910]。就目前的资料来看，两种方法各有优缺点。酶解法是细胞生物学研究中分离各种组织、器官中细胞的常用方法，因其操作简便有效而受到普遍应用。酶解法分离卵泡时，普遍采用胶原蛋白酶和脱氧核糖核酸酶组合配制成分离液。这种分离液利用酶消化卵巢间质组织中的胶原蛋白，使卵泡从卵巢组织释放出来，故在限定时间里可望收获较多的游离卵泡。有报道表明，用酶解法分离卵泡培养的卵母细胞可有更高成熟率和卵裂率的趋势[11]。但是，分离液长时间浸泡卵巢组织时，显然可能导致卵泡基底膜受到损伤，从而使卵泡在后续培养中更易于退化，降低了卵泡培养的残存率，因此酶的作用浓度和时间是个关键的问题。

用机械法分离卵泡，如果操作手法得当，可能保持卵泡基底膜的完整，从而在体外培养过程中更容易维持卵泡的立体结构，保障更高的培养残存率。Carrell等和Park等的结果显示，用机械法分离的卵泡，其残存率存活率显著高于用酶解法分离者[1213];Shen等还进一步利用机械法来源的小鼠卵泡培育成熟卵母细胞并成功制备了IVFET小鼠[4]。但是，也有报道表明，移植后卵巢切片显示有些腔前卵泡的卵母细胞与其周围颗粒细胞的联系很薄弱[14]。用机械法从致密的卵巢间质组织中分离卵泡时，往往难于避免牵拉卵泡的力量过大，很容易破坏卵母细胞与颗粒细胞的连接，而卵母细胞和颗粒细胞的缝隙连接异常，会影响卵母细胞的发育并导致减数分裂阻断[1516]。故机械法能否保障卵泡存活率在很大程度上依赖于操作技巧，同时在有限的分离操作时间里很难提高卵泡的回收量。从目前的报道来看，单用机械法从每枚卵巢中得到的卵泡数量非常有限，平均每个卵巢只有1251和1127个[4,14]。

本研究结果表明，酶解法的卵泡回收量、分离后卵泡培养的残存率、排卵率均低于机械法(表1，3)，但分离刚结束时的卵泡活率却高于机械法(表2)。此结果与Demeestere等的报道不符，却与Carrell等和Park等的报道相似[1113]。说明酶解法在分离卵泡时对卵泡造成的直接损伤较少，但对卵泡的远期存活不利。值得注意的是，本研究采用酶解法分离卵泡时，设置了C组即短时酶解法，采用酶解过程中每隔5 min收获1次卵泡的改变法，而该组的排卵率显著高于常规的20 min酶解处理组，证明减少酶的作用时间是有价值的。

为了提高分离卵泡的回收量，同时又保障较高的培养残存率、排卵率和卵泡的生殖潜能，本研究建立了将酶解法和机械法相结合来分离新生小鼠卵巢移植物中腔前卵泡的技术方案。在结合法(D组)中，将卵巢组织块先在含有胶原蛋白酶和脱氧核糖核酸酶的分离液中37 ℃消化5 min，随即采用与单纯机械法相同的操作手法进行剥离，同时将剥离出的卵泡立即转移至不含酶的培养液中。此做法利用酶的消化作用使卵泡周围的结缔组织得到一定消化，卵巢组织变得比较松散，从而减少机械剥离时对卵泡的牵拉损伤，同时又使游离出的卵泡及时离开分离液，减少了水解酶对卵泡的作用时间，比单纯酶解法或单纯机械法更有利于保持卵泡的三维结构。实验结果表明，D组中分离后卵泡的存活率与单纯酶解法(B、C组)无差别，但高于单纯机械法(A组)，而每块卵巢的卵泡回收量、平均排卵数、卵母细胞成熟率多项指标均高于其他各组，说明结合法具有绝对优于两法单用的趋势。同时，采用结合法从每个卵巢移植块获得9713个卵泡(相当于194卵泡/卵巢)其中4066%达到排卵，显著高于国内外文献所报道的相应数据。值得注意的是，本研究用来源于4种分离方法所培育的卵母细胞进行体外受精，其受精率在各组间并无显著差异，说明分离技术只对卵泡在后续培养中的发育与成熟有影响，而对那些发育至成熟的卵母细胞的生殖潜能并无显著影响。

实验结果提示，本研究建立的酶解机械结合法是一个良好的卵泡分离技术，对卵巢组织工程的技术进步具有实际应用价值。

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2009年9月全国计算机等级考试三级笔试试卷

数据库技术

（考试时间120分钟，满分100分）

一、选择题（每题1分，共60分）

（1）数字信号处理器由于在其内部设计了能够高速处理多路数字信号的电路，可以用在需要快速处理大量复杂信息的领域。下列哪一个设备不需要数字信号处理器？

A) 雷达

B) 彩色电视机

C) 数字音视频设备

D) 数字图像处理设备

（2）八进制数1507转换成十进制数是多少？

A) 838

B) 839

C) 840

D) 841

（3）数据包要求从源主机出发，最终到目的主机。下列哪一个设备可为数据包选择输出路径，将它从一个网络传送到另一个网络？

A) 通信线路

B) 路由器

C) WWW服务器

D) 调制解调器

（4）当电子邮件软件从邮件服务器读取邮件时，可以使用下列哪一个（些）协议？

Ⅰ简单邮件传输协议SMTP

Ⅱ邮局协议POP3

Ⅲ交互式邮件存取协议IMAP

A) 仅Ⅰ

B) 仅Ⅱ

C) 仅Ⅱ和Ⅲ

C) 仅Ⅰ和Ⅲ

（5）在下载的普通程序中隐含了一些非法功能的代码，用于窃取用户私密信息或执行其他恶意程序，这种恶意软件的攻击方式称为

A) 特洛伊木马

B) 后门陷阱

C) 逻辑炸弹

D) 僵尸网络

（6）下列关于ADSL技术的叙述中，哪些是正确的？

Ⅰ它是在普通电话线上的一种心得高速宽带技术

Ⅱ它为用户提供上、下行对称的传输速率

ⅢADSL宽带接入方式可用于网络互联业务

A) 仅Ⅰ和Ⅱ

B) 仅Ⅱ和Ⅲ

C) 仅Ⅰ和Ⅲ

D) 全部

（7）数据结构概念一般包括三个方面的内容，它们是

A) 数据的逻辑结构、数据的传输结构、数据的分析挖掘

B) 数据的逻辑结构、数据的存储结构、数据的运算

C) 数据的存储结构、数据的展示方式、数据的运算

D) 数据的传输结构、护具的展示方式、数据的分析挖掘

（8）下列关于链式存储结构的叙述中，哪些是不正确的？

Ⅰ逻辑上相邻的结点物理上不比邻接

Ⅱ每个结点都包含好一个指针域

Ⅲ用指针来提现数据元素之间逻辑上的联系

Ⅳ结点中的指针都不能为空

Ⅴ可以通过计算直接确定第i个结点的存储地址

A) 仅Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ

B) 仅Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ

C) 仅Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ

D) 仅Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ

（9）栈结构不适用与下列哪一种应用？

A) 表达式求值

B) 树的层次次序周游算法的实现

C) 二叉树对称序周游算法的实现

D) 快速排序算法的实现

（10）下列哪一个不是从列的基本运算？

A) 从队尾插入一个新元素

B) 判断一个队列是否为空

C) 从队列中删除第1个元素

D) 读取队头元素的值

（11）俺行有限顺序存储下上角矩阵

（12）在包含1000个元素的线性表中实现如下各运算，哪一个所需的执行时间最短？

A) 线性表按顺序方式存储，查找关键码值为900的结点

B) 线性表按链接方式存储，查找关键码值为900的结点

C) 线性表按顺序方式存储，查找线性表中第900个结点

D) 线性表按链接方式存储，查找线性表中第900个结点

（13）下列关于二叉树的叙述中，哪一条是正确的？

A) 二叉树的结点的有限集合，这个集合不能为空集

B) 二叉树是树的特殊情况，即每个结点的子树个数都不超过2

C) 二叉树的每个非叶结点都恰有两颗非空子树

D) 每一棵二叉树都能唯一地转换到它所对应的树（林）

（14）设有字符序列（Q、H、C、Y、P、A、M、S、R、D、F、X），则新序列（H、C、Q、P、A、M、S、R、D、F、X、Y）是下列哪一种排序算法一趟扫描的结果？

A) 起泡排序

B) 初始步长为4的希尔排序

C) 二路归并排序

D) 堆排序

（15）对n个记录的文件进行快速排序，平均执行时间为

A) O(log2n)

B) O(n)

C) O(olog2n)

D) O(n2)

（16）下列哪一个不是网络操作系统应该支持的功能？

A) 网络管理

B) 网络通信

C) 资源共享

D) 负载均衡

（17）下列指令中，哪一个不是特权指令？

A) 访管指令

B) 启动设备指令

C) 设置时钟指令

D) 停机指令

（18）一个进程从运行态转换为就绪态的原因是

A) 该进程执行时出错

B) 该进程等待某个资源

C) 该进程用完分配的时间片

D) 该进程等待的资源变为可用

（19）读者写者问题的解决方案如下所示：

（20）下列哪一项不是存储管理的任务？

A) 内存共享

B) 存储保护

C) 地址映射

D) 指针定位

（21）下列关于工作集模型的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 每个进程有一个工作集

B) 工作集大小与缺页率无关

C) 工作集大小是可以调整的

D) 工作集模型可以解决系统的颠簸（抖动）问题

（22）下列关于文件结构的叙述中，哪一（些）条是正确的？

Ⅰ源程序、目标代码等文件属于流式文件

Ⅱ每个记录包含一个记录键和其他属性

Ⅲ记录式文件中的记录都是定长的

A) 仅Ⅰ

B) 仅Ⅰ和Ⅱ

C) 仅Ⅱ和Ⅲ

D) 仅Ⅰ和Ⅲ

（23）如果某一个文件的物理结构采用的是UNIX的三级索引结构，如图所示。假设一个物理块可以存放128个块号，要查找块号为15000的物理块，需要用到哪一级索引表？

A) 主索引表

B) 一级索引表

C) 二级索引表

D) 三级索引表

（24）磁盘驱动调度中的移臂调度的目标是减少

A) 磁头寻到时间

B) 旋转延迟时间

C) 数据传输时间

D) 中断处理时间

（25）以树形结构表示实体之间联系的数据模型是

A) 层次模型

B) 网状模型

C) 关系模型

D) 面向对象模型

（26）在一个数据库中，模式与内模式的映像个数是

A) 1个

B) 与用户个数相同

C) 有设置的系统参数决定

D) 任意多个

（27）在嵌入式SQL中，与游标相关的有四个语句，它们中哪一个执行游标定义中的SELECT语句？

A) DECLARE

B) OPEN

C) FETCH

D) CLOSE

（28）信息是有价值的，信息的价值主要与下列哪些因素有关？

Ⅰ准确性

Ⅱ及时性

Ⅲ完整性

Ⅳ可靠性

Ⅴ可移植性

A) 仅Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ

B) 仅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ

C) 仅Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ

D) 都相关

（29）设有关系SC(SNO,CNO,GRADE)，其主码是(SNO,CNO)。遵照实体完整性规则

A) 只有SNO不能取空值

B) 只有CNO不能取空值

C) 只有GRADE不能空值

D) SNO与CNO都不能取空值

（30）如果对关系emp（eno，ename，salray）成功执行下面的SQL语句：

CREATE CLUSTER INDEX name_index ON emp （salary）

对此结果的正确描述是

A) 在emp表上按salary升序创建了一个唯一索引

B) 在emp表上按salary降序创建了一个唯一索引

C) 在emp表上按salary升序创建了一个聚簇索引

D) 在emp表上按salary降序创建了一个聚簇索引

（31）设关系R和S的元数分别是r和s，且R有n个元组，S有m个元祖。执行关系R和S的笛卡尔积，记为T=R×S，则

A) T的元数是（r×s），且有（n+m）个元祖

B) T的元数是（r×s），且有（n×m）个元祖

C) T的元数是（r+s），且有（n+m）个元祖

D) T的元数是（r+s），且有（n×m）个元祖

（32）设课程和教师是两个实体型，如果每一门课程可以由若干位教师讲授，每一位教师可以讲授若干门课程，则课程与教师这两个实体型之间的联系是

A) 一对一

B) 一对多

C) 多对多

D) 不确定

（33）在关系代数中，下列哪一个等式是不确定的？

（34）在SQL语言中，一个基本表的定义一旦被删除，则与此表相关的下列内容中哪一个（些）也自动被删除或失效？

Ⅰ此表中的数据

Ⅱ此表上建立的索引

Ⅲ此表上简历的视图

A) 仅Ⅰ

B) 仅Ⅱ

C) 仅Ⅲ

D) 全部

第（35）-（36）题基于“学生-选课-课程”数据库中的三个关系：

S（S#，SNAME，SEX，AGE），SC（S#，C#，GRADE），C（C#，CNAME，TEACHER）它们的主键用下划线标出。

（35）定义一个反映学生姓名及他的平均成绩的视图将使用关系

A) S和C

B) SC和C

C) S和SC

D) S、SC和C

（36）“查询选修了3门以上课程的学生的学生号”，正确的SQL语句是

A) SELECT S# FROM SC GEOUPBY S# WHERE COUN（）〉3

B) SELECT S# FROM SC GEOUPBY S# HAVING COUN（）〉3

C) SELECT S# FROM SC ORDER S# HAVING COUN（）〉3

D) SELECT S# FROM SC ORDER S# WHERE COUN（）〉3

（37）下列哪一类视图上可以进行插入、删除和更新操作

A) 带表达式的视图

B) 连接视图

C) 行列子集视图

D) 分组视图

（38）下列关于E-R图的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 实体型用矩形表示，属性用椭圆形表示，联系型用菱形表示

B) 实体型之间的联系可以分为1：1、1：n和m：n三类

C) 1：1联系是1：n联系的特例，1：n联系是m：n联系的特例

D) 实体型之间的联系只存在与两个实体型之间

（39）下列叙述中，哪些是SQL的功能特点？

Ⅰ集DDL、DML和DCL功能于一体

Ⅱ是高度非过程化语言

Ⅲ采用面向集合的操作方式

Ⅳ具有自含式嵌入式两种灵活的使用方式

Ⅴ语言简介、易学易用、功能强

A) 仅Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ

B) 仅Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ

C) 仅Ⅰ、Ⅳ和Ⅴ

D) 都是

（40）下面是SQL主要数据定义语句列表，其中哪一（些）行是正确的？

A) 仅“模式”行

B) 仅“基本表”行

C) 仅“视图”行和“索引”行

D) 所有行

（41）设关系R、S和T如下。关系T是关系R和S执行哪种操作的结果？

A) 自然连接

B) 外部并

C) 半连接

D) 外连接

（42）在物理存储器层次结构中，下列哪一个存储设备是联机存储？

A) 高速缓存

B) 主存储器

C) 第二级存储器

D) 第三级存储器

（43）数据库中为了将大小不同的记录组织在同一个磁盘块中，常采用分槽的页结构。结构的块头中不包括

A) 块中记录的数目

B) 读取时需要的缓存大小

C) 块中空闲的末尾指针

D) 由包含记录位置和大小的条目组成的数组

（44）下列关于索引的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 顺序索引能有效地支持点查询

B) 顺序索引能有效地支持范围查询

C) 散列索引能有效地支持点查询

D) 散列索引能有效地支持范围查询

（45）下列关于基于日志的故障恢复的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 日志是日志记录的序列，它记录了数据库izhong的所有更新活动

B) 日志记录中包括事务提交日志记录<Ti commit>

C) 利用更新日志记录中的改前值可以进行UNDO

D) 事务故障恢复只需要正向扫描日志文件

（46）下列哪一个不属于SQL2000服务器端提供的服务？

A) SQL服务器服务

B) SQL服务器代理

C) 查询分析器服务

D) 分布式事务协调服务

（47）下列哪些属于SQL Sercer 2000中常用的数据库对象

Ⅰ表

Ⅱ约束

Ⅲ规则

Ⅳ索引

Ⅴ数据类型

Ⅵ用户自定义函数

A) 仅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ

B) 仅Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ

C) 仅Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅵ

D) 都是

（48）下列哪一个不属于Oracle实例？

A) 存储数据的集合

B) 系统全局区

C) 用户进程

D) Oracle

（49）Oracle引入了新的数据类型可以存储极大的对象。其中，BLOB的中文解释为

A) 二进制数据型大对象

B) 字符数据型大对象

C) 存储的数据库之外的只读型二进制数据文件

D) 固定宽度的多字节字符数据型大对象

（50）下列哪些条不属于数据库设计的任务？

Ⅰ数据库物理结构设计

Ⅱ数据库逻辑结构设计

Ⅲ数据库概念结构设计

Ⅳ数据库应用结构设计

Ⅴ数据库管理系统设计

A) 仅Ⅰ和Ⅱ

B) 仅Ⅱ和Ⅲ

C) 仅Ⅲ和Ⅳ

D) 仅Ⅳ和Ⅴ

（51）下列哪一条不是概念模型应具备的性质？

A) 有丰富的语义表达能力

B) 在计算机中实现的效率高

C) 易于向各种数据模型转换

D) 易于交流和理解

（52）下列关于函数依赖的叙述中，哪一条是不正确的？

（53）设有关系模式R（X、Y、Z），其中X、Y、Z均为属性或属性组。下列关于多值依赖的叙述中，哪一（些）条是正确的？

A) 仅Ⅱ

B) 仅Ⅲ

C) 仅Ⅰ和Ⅲ

D) 仅Ⅱ和Ⅳ

（54）若关系模式R中没有非主属性，则

A) R肯定属于2NF，但R不一定属于3NF

B) R肯定属于3NF，但R不一定属于BCNF

C) R肯定属于BCNF，但R不一定属于4NF

D) R肯定属于4NF

第（55）-（56）题基于一下描述：有关系模式P(A，B，C，D，E，F，G，，H，I，J)，根据语义有如下函数依赖集：F={ABD→E，AB→G，B→F，→CJ，C→I，G→H}。

（55）关系模式P的码为

A) （A，B，C，G）

B) （A，B，D，I）

C) （A，C，D，G）

D) （A，B，C，D）

（56）现将关系模式P分解为两个关系模式P1（A，B，D，E，F，G，H）和P2（C，I，J）。这个分解

A) 不具有无损连接性，不保持函数依赖

B) 具有无损连接性，不保持函数依赖

C) 不具有无损连接性，保持函数依赖

D) 具有无损连接性且保持函数依赖

（57）下列关于以Web服务器为中心的浏览器/服务器模式的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 与传统的客户机/服务器结构相比较，Web服务器负载过重

B) 与传统的客户机/服务器结构相比较，HTTP协议的效率低

C) 服务器扩展程序主要使用CGI和Web API两种编程接口编写

D) CGI在执行时动态加载到Web服务器进程内

（58）下列关于 Visual Studio 2008 的叙述中，哪一条是不正确的？

A) Visual Studio 2008 彻底解决了需要绑定一个特定版本的CLR（通用语言架构机制）的问题

B) Visual Studio 2008 实现了Dreamwaver 网页编辑的功能

C) Visual Studio 2008 对AJAX 和java script提供了更丰富的支持

D) Visual Studio 2008 允许编写使用LINQ的代码

（59）下列关于分布式数据库系统的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 每一个节点是一个独立的数据库系统

B) 具有位置透明性、复制透明性和分片透明性等

C) 有关数据分片、分配和副本的信息存储在局部目录中

D) 对于并发控制和恢复，分布式DBMS环境中会出现大量的在集中式DBMS环境中碰不到的问题

（60）下列关于面向对象数据库和关系数据库系统的叙述中，哪一条是不正确的？

A) 面向对象数据库设计与关系数据库设计之间一个最主要的区别是如何处理联系

B) 面向对象数据库设计与关系数据库设计中，处理继承的方法是相同的

C) 在面向对象数据库中，通过使用继承构造来获得映射

D) 在面向对象数据库中，联系是通过使用联系特性或者包括相关对象的对象标识符的参照属性来处理的

二、填空题（每空2分，共40分）

（1）为了改变指令系统计算机指令过多的状态而设计的一种计算机系统结构称为精简指令系统计算机，其英文缩写为 1 。

（2）标准的URL由三部分组成：协议类型、 2 和路径/文件名。

（3）对线性表进行二分发检索，其前提条件是线性表以 3 方式存储，并且按关键码值排好序。

（4）霍夫曼算法是求具有最 4 带权外部路径长度的扩充二叉树的算法。

（5）m阶B树的根节点至多有 5 棵子数。

（6） 6 是操作系统向系统用户提供的程序级服务，用户程序借助它可以向操作系统提出各种服务请求。

（7）最著名的死锁避免算法是 7 算法。

（8）可以采用虚拟设备技术来提高独占设备的利用率，说采用的具体技术称为 8 技术。

（9）根据抽象的层面不同，数据模型可分为：概念模型、 9 层模型和物理层模型。

（10）关系数据模型的完整性约束主要包括：域完整性约束、实体完整性约束和 10 完整性约束三类。

（11）动态SQL语句是指在SQL程序编译时其中有些部分尚未确定，需要在程序的 11 过程中临时生成的SQL语句。

（12）在关系代数中，从两个关系的笛卡尔积中选取它们的属性或属性组间满足一定条件的元组得到新的关系操作称为 12 。

（13）选择逻辑查询计划和选择物理查询计划的步骤称为查询 13 。

（14）多个事务在某个调度下的执行是正确的，是能保证数据库一致性的，当且仅当该调度是 14 的。

（15）Oracle针对Intrnet/Intranet的产品是Oracle 15 。

（16）抽象数据类型是一种用户定义的对象数据类型，它由对象的 16 及其相应的方法组成。

（17）若X→Y，且则称X→Y为 17 的函数依赖。

（18）如果关系模式R的规范化程度达到了4NF，则R的属性之间不存在非平凡且非 18 的多值依赖。

（19）一个多媒体数据库必须采用一些模型使其可以基于 19 来组织多媒体数据源，并为它们简历相应的索引。

（20）数据集市是一种更小、更集中的 20 ，他为公司提供了分析商业数据的一条廉价途径。

2009年9月全国计算机等级考试三级数据库笔试参考答案

一、选择题

（1）

B

（2）

B

（3）

B

（4）

C

（5）

A

（6）

C

（7）

B

（8）

D

（9）

B

（10）

C

（11）

D

（12）

C

（13）

D

（14）

A

（15）

C

（16）

D

（17）

A

（18）

C

（19）

B

（20）

D

（21）

B

（22）

B

（23）

C

（24）

A

（25）

A

（26）

A

（27）

B

（28）

B

（29）

D

（30）

C

（31）

D

（32）

C

（33）

A

（34）

D

（35）

C

（36）

B

（37）

C

（38）

D

（39）

D

（40）

B

（41）

D

（42）

C

（43）

B

（44）

D

（45）

D

（46）

C

（47）

D

（48）

A

（49）

A

（50）

D

（51）

B

（52）

C

（53）

D

（54）

B

（55）

D

（56）

C

（57）

D

（58）

A

（59）

C

（60）

B

二、填空题

(1)RISC

(2)主机名

(3)顺序

(4)小

(5)m

(6)系统调用

(7)银行家

(8)SPOOLing

(9)逻辑

(10)参照

(11)执行

(12)连接

(13)查询优化

(14)可串行化

(15)WebServer

(16)属性

(17)非平凡函数依赖

(18)函数依赖

(19)内容

(20)数据仓库

最佳路线为：地铁5号线 → 地铁1号线 → 7路，耗时1小时5分钟，共计，202公里，需要步行780米。

杭州南站步行220米－火车南站上车－地铁5号线 （金星方向）6站－滨康路站下车－站内换乘步行180米－滨康路站上车－地铁1号线 （萧山国际机场方向）8站－龙翔桥站 （B口出） 下车－步行280米－胜利剧院站上车－7路2站－少年宫站下车－步行110米－到达西湖风景区。

西湖简介：

西湖南、西、北三面环山，湖中白堤、苏堤、杨公堤、赵公堤将湖面分割成若干水面。西湖的湖体轮廓呈近椭圆形，湖底部较为平坦，湖泊平均水深为227米，最深约5米，最浅不到1米。

湖泊天然地表水源是金沙涧、龙泓涧、赤山涧（慧因涧）、长桥溪四条溪流。西湖地处中国东南丘陵边缘和中亚热带北缘，年均太阳总辐射量在100—110千卡／平方厘米之间，日照时数1800—2100小时。 

西湖有100多处公园景点，有“西湖十景”、“新西湖十景”、“三评西湖十景”之说，有60多处国家、省、市级重点文物保护单位和20多座博物馆，有断桥、雷峰塔、钱王祠、净慈寺、苏小小墓等景点。

-西湖