小鼠造模后16小时取材，怎么计划时间

小鼠造模方法。方法三次造模分别采用：免疫介导法：小鼠经60Gy60Coγ射线亚致死量全身

由尾静脉输入DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞悬液1×106个细胞/02ml/只。混合方法：小鼠一次全身30Gy60Coγ射线照射后，分照射后，

5、6天腹腔注射环磷酰胺500mg/kg及氯霉素625mg/kg。化学方法：用苯+玉米油，3次/w，别在第4、背部皮下注射，共注射15次。同时腹腔注射环磷酰胺溶液（50mg/kg），每日1次共7次。结果

免疫介导法造模后模型小鼠在15d内除1只小鼠外全部死亡；混合方法造模，模型小鼠骨髓

免疫介导和混合方法造模速度快，对模型小鼠骨髓抑制明显，与临床急性AA

活检提示造模失败；化学方法造模，造模成功，模型维持时间长。

一、实验目的： 通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓拿、标记、给药（灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射）、取血（眶后静脉丛，摘眼球）、脊椎脱臼法处死、大体解剖。

二、实验动物： 昆明小鼠2只（1雌1雄）

三、实验步骤

1、抓取和固定，标记

2、去毛

3、给药：消化道、腹腔往射、尾静脉注射

4、取血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法

5、麻醉：氯胺酮腹腔麻醉

6、处死：脊椎脱臼法

7、解剖：

雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明）

雌性：双角子宫、卵巢

肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺

四、实验结果

1、抓取和固定标记：

抓取：抓小鼠的尾根部

固定：抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部，右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤，小指和无名指将尾巴固定在手掌面。

2、灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针，紧贴咽后壁，头后仰以便伸直消化道，进针2/3后灌生理盐水05ml

3、注射给药：

腹腔注射：

从下腹部的两侧进针，进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针，如无粘滞感则可注射药物。

尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食指托住尾部在尾动脉位置进针注射05ml生理盐水。注射完毕拔出针头，用无菌棉球压迫止血。

4、采血

从眼角内侧05cm处进针

眼球摘除法：左手抓取用固定小鼠，右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除，头朝下，眼眶内血迅速流出。

5、麻醉：

05%氯胺酮腹腔麻醉：本小鼠重22g，按100mg/kg的药量给药，2分钟麻醉成功

6、处死：

脊椎脱臼法：按住头部，将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死

7、解剖：

雄性：寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺

雌性：双角子宫、卵巢372肾上腺：米粒大小

胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状374， 胆囊：芝麻大小，浅绿色，半透明，甲状腺：紧贴环状软骨，另可解剖出胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏。

五、实验讨论

1、小鼠抓取的感受：

小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作，如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。

2、小鼠尾静脉注射感受：

首先，注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟，有利于注射；其次，先远后尽，不要一开始就从尾根部，那样失败了不好办；再次，进血管后注意保持稳定，针尖很容易刺穿血管的。尾静脉就在尾巴的正左右两边，先用酒精用力擦，可以去掉部分角质，然后按住近心端让充血，就很容易看到了。进针大概1~2厘米是最合适的。

尾静脉注射时，可用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭，可使血管扩张，同时也可软化表皮角质。以左手拇指和食指夹住鼠尾，使静脉充盈，中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢，右手持注射器（连5号细针头），针头与静脉夹角一般小于30度，从距尾尖2 - 3厘米处进针，此处皮薄易进入，先抽回血，见到血后再缓慢注入少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续往入。一般推注速度为005 - 010m秒，一次注入量为005 - 025ml/10g体重。如反复注入，应尽可能从尾末端开始，以后向尾根部方向移动注射。

红平果软件试用、了解更多虚拟仿真技术：19103710763

这个问题问的，肯定是防止被咬啊，其实大鼠比小鼠温顺的多，别看他体积大，大鼠有两种保定方法，一种是三叉式的，右手大拇指食指，中指把大鼠卡住，但是不要卡的太紧，容易窒息，比较适合手小的女孩子，还有一种是最常用的抓颈背部皮毛，如果害怕就提着尾巴把他转几圈，然后迅速上手抓，但是一般只要你温柔点不要把他惹毛，他不会太暴躁，很好抓，先用手掌把他轻轻压住，然后手指一收就抓起来了，他也不叫很乖，小鼠一样的方法，

最重要的就是不要让动物受惊或者害怕，你可以抚摸它背部的皮毛，跟人一样嘛，谁要抓你，你肯定挣扎，你对他好，他就让你抓，让你灌胃。

　小鼠的饲养管理非常繁琐，要求饲养人员具有高度的责任心，随时检查小鼠状况，出现问题立即加以纠正。下面是我精心为你整理的小鼠的饲养方法，一起来看看。

小鼠的饲养方法

　1 饲喂

　小鼠胃容量小，随时采食，是多餐习性的动物。成年鼠采食量一般为3～7克/天，幼鼠一般为1～3克/天。应每周添料3～4次，在鼠笼的料斗内应经常有足够量的新鲜干燥饲料，在小鼠大群饲养中，每周应固定两天添加饲料，其它时间可根据情况随时注意添加。

　根据小鼠不同阶段的生长发育特点，应有不同的给饲标准。由于种鼠群和生产鼠群交配繁殖频繁，尤其生产种母鼠的负担重，能量消耗大，因此除供给足够的块料外，还要定时饲喂少量葵花籽、麦芽和拌有鸡蛋的软料。葵花籽供应量为05～1克/天/只成年鼠。而麦牙和软料由于微生物条件较难控制，目前趋于淘汰不用，而致力于颗粒料的全价营养，即用维生素合剂代替。

　2 给水

　用饮水瓶给水，每周换水2～3次，成年鼠饮水量一般为4～7ml/天，要保证饮水的连续不断，应常检查瓶塞，防止瓶塞漏水造成动物溺死或饮水管堵塞使小鼠脱水死亡。小鼠在吸水过程中，口内食物颗粒和唾液可倒流入水瓶。为避免微生物污染水瓶，换水时应清洗水瓶和吸水管。严禁未经消毒的水瓶继续使用。

　3 清洁卫生和消毒

　每周应至少更换两次垫料。换垫料时将饲养盒一起移去，在专门的房间倒垫料，可以防止室内的灰尘和污染。一级以上动物的垫料在使用前应经高压消毒灭菌。

　要保持饲养室内外整洁，门窗、墙壁、地面等无尘土。

　坚持每月小消毒和每季度大消毒一次的制度。即每月用01 %新洁尔灭喷雾空气消毒一次,室外用3%来苏尔消毒,每季度用过氧乙酸(02%)喷雾消毒鼠舍一次。笼具、食具至少每月彻底消毒一次，鼠舍内其它用具也应随用随消毒。可高压消毒或用02 %过氧乙酸浸泡。

　应有周转用房，在饲养室使用一年时，将小鼠全部移入，原饲养室彻底整修消毒。

　4 动物健康的外观检查

　这是检查动物健康状况的一项常规工作。外观判断小鼠健康的标准是：

　①食欲旺盛;

　②眼睛有神，反应敏捷;

　③体毛光滑，肌肉丰满，活动有力;

　④身无伤痕，尾不弯曲，天然孔腔无分泌物，无畸形;⑤粪便黑色呈麦粒状。

　5 性别鉴别

　成年鼠性别很易区分，雄鼠的阴囊明显;雌鼠可见阴道开口和五对乳头。

　幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定，近者为雌，远者为雄。另外，雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟，而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。再者，雌鼠有比雄鼠明显很多的乳头。

小鼠的饲养管理技术

　(一)小鼠饲养管理的基本条件

　饲养小鼠的基本条件包括鼠舍及笼具设备。由于前述小鼠的生物学特性及习性，小鼠对房舍的建筑和环境条件的要求比较严格，鼠舍应满足基本要求，如温度、湿度、噪音、氨浓度、通风换气和气流等条件。

　笼具可采用瓦罐、塑料罐或塑料盒，按照体重20 g的小鼠计算，每只小鼠需要饲养笼具面积0009～0063 m2，最好是分为5～10只小笼饲养。非同窝的性成熟雄鼠放在一起时，易互斗并咬伤，所以已配过种的雄鼠应单独饲养。笼具上配以合适的上盖，上盖用金属网，网孔大小以逃不出仔鼠为原则。笼具上应配备饮水器具，以玻璃瓶或塑料瓶配以瓶塞组成，瓶塞中间打孔插入铝管或两端烧钝的玻璃管作为饮水管，饮水管的内径5～6毫米，外径7～8毫米。笼具内用清洁、干燥的小刨花或锯末作为垫料。笼具应摆放在鼠架上，以节约鼠舍空间。

　(二)小鼠的饲料

　小鼠的饲料，要求必须保持营养物质的平衡稳定，富含蛋白质，否则会影响生长发育、生产繁殖(如产仔数下降、不愿喂奶、嚼食仔鼠等)和抵抗疾病的能力(尤其在断奶时仔鼠死亡率高)。

　小鼠对维生素、矿物质的要求也比较高，长期缺乏这些营养物质时，仔鼠生长缓慢，并出现死亡。另外，小鼠的饲料不宜经常更换，如果饲料不稳定，易引起小鼠生长停滞、繁殖率下降等情况发生。

　小鼠饲料采用块料，一般是按照配方制作成块料后烘干。我们根据当地的饲料来源，常用的小鼠饲料基础配方为：白面40 %，玉米面25 %，麸皮20 %，豆粉15 %。混合后另加：鱼粉4 %，鸡蛋1 %，酵母粉1 %，骨粉3 %，食盐1 %，鱼肝油1 %。充分混合，加温水拌匀，压实切块，晒干烘干。烘烤的温度不宜超过80 ℃，时间不能太长，否则容易破坏维生素等营养成分。制作小鼠饲料的原料及成品饲料要包装严密，防止污染，放置在干燥、凉爽的环境中。饲料不宜久放，因存放时间过久，营养物质损失过多，则不能满足小鼠的生理需要。对清洁级小鼠，所用饲料应经过灭菌。

　(三)小鼠的饲养管理

　小鼠采食以夜间为主，应在每天下午加满料块及饮水，并于次日早上检查，补充缺料笼具的料块，不一定每笼必加。

　管理要求如下：

　温度：18～22 ℃，每日观察温度，必要时调整温度。

　相对湿度：50～60%，每日用干湿球温度计估计湿度，必要时采取措施调整湿度。

　噪音：60分贝以下

　照明：10～14小时，每日8:00开灯，18:00～20:00关灯。

　氨气：20 ppm以下

　换气：8～20次/小时

　气流：10～25厘米/分

　笼具：一般每周换一次小鼠笼具内的垫料，每月对笼具洗涤、消毒一次。

　饮水瓶：供应清洁无污染的饮水。每3天洗一次饮水瓶，并注意添加新鲜洁净的饮水。每月煮沸消毒一次。

　饲养室：室内每月用01%新洁尔灭喷雾消毒;每季度用过氧乙酸熏蒸消毒。严禁非本室工作人员随意进入。每日观察温度、并用干湿球温度计估计湿度，必要时调整温度，或采取措施调整湿度。

　(四)小鼠的性别鉴定和抓取与保定方法

　雌鼠可见明显的阴道开口和五对乳头，肛门与外生殖器距离较近;雄鼠可见明显的阴囊，肛门与外生殖器距离较远。

　保定小鼠时，用右手从笼盒中将小鼠尾部抓住并提起，放在笼盖(或表面粗糙的物体)上，轻轻向后拉鼠尾，在小鼠向前挣脱时，用左手的拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部，中指固定其前肢，并调整好小鼠在手中的姿势。抓取小鼠的整个动作要快，切不可粗暴，否则可能把小鼠捏伤。