重组纤连蛋白相对于I型、III型重组人源胶原蛋白的核心优势在于其能够利用粘附+促进胞外胶原蛋白增加,起到很好保湿、修复、祛皱等功效。此外,重组纤连蛋白在修复再生上的优势也很明显,其分子量较小,更加易于吸收,功效更佳。
重组III型人源化胶原蛋白具有更安全、更有效的优势,其氨基酸序列与人体自身的胶原蛋白氨基酸序列特定功能区100%一致,应用人体无排异,细胞黏附率为天然胶原蛋白的190%,生物相容性、活性好,拥有更强的亲和力,可发挥与人体自身胶原蛋白类似的功能。同时,其核心功能区呈16488°柔性弯曲,串联重复序列呈现更多正向结合位点,活性远高于人I型和III型胶原蛋白,极利于细胞黏附,发挥强大全功能修复作用,促进组织的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的再生。
cho与mrna有以下区别。
1、重组新型冠状病毒疫苗(CHO细胞)为重组亚单位疫苗,无病毒核酸成分,以新型冠状病毒S蛋白的受体结合域(RBD)为靶点,通过重组表达RBD蛋白,诱导人体产生中和抗体,从而阻断新型冠状病毒与宿主细胞表面受体ACE2结合。
2、mRNA是一种天然存在的分子,带有人类细胞的蓝图,可以产生靶标蛋白或免疫原,激活体内免疫反应,以对抗各种病原体。mRNA疫苗利用的是病毒的基因序列而不是病毒本身,因此,mRNA疫苗具有不带有病毒成分,没有感染风险。
一抗是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。一抗可以特异性地结合底物,识别出我们想要检测的东西。检测任何靶蛋白都有多种抗体可供选择,那如何进行一抗的选择呢?
1)确定实验样本的种属
确定自己实验所用样本的种属,如human、rat、mouse、pig、goat等。应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高。如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过。可以通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy和NCBI BLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。如果比对结果,证明同源性比较高的,也可以选择。
(2)确定实验类型
确定自己的实验类型,如WB、IHC、ICC、ELISA、FCM分析等,一般抗体说明书会列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如未提及并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种分析试验验证。如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。
(3)分析 样本蛋白的结构性质
分析了解样本蛋白的结构性质有助于选择合适的抗体,抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FCM流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。
(4)抗体宿主物种的选择
一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,而是选兔源的一抗,二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大。
二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如ELISA(以偶联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)等。
二抗针对某一特定物种(如小鼠)的抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号增强,提高了实验灵敏度。二抗可以偶联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。如何选择二抗?通常情况下,某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择,如何能选择到适合该实验的二抗,需要综合以下几个方面进行考虑:
(1)一抗的种属来源
根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。如果一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。
(2)一抗是属于哪个类或亚类
除了要与一抗的种属来源相一致,二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配,这通常是针对单克隆抗体而言。一般来说多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。而单克隆抗体则相对复杂些,由于单克隆抗体有不同的类别和亚型,因此相应的二抗也需要根据这些亚型进行选择。
(3)二抗的种属来源
一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,此时二抗就不能选山羊或者小鼠来源的。选择相应的驴来源的二抗,就非常适合做类似双标的免疫实验。双标得2个都抗才行,故选择第3个种源的抗体。
(4)选择哪种形式的二抗,是整个IgG分子,Fab片段,还是F(ab')2片段?
整个IgG分子 :此种抗体适用于多数情况。
Fab 片段 :它们只有一个结合位点,一般用来封闭内源性免疫球蛋白。
F(ab')2 片段 :该种抗体是由两个靠二硫键连接的用于结合抗原的Fab片段组成,这些抗体用在特定的情况中,如需要避免抗体与具有Fc受体的细胞结合的情况。
(5)二抗的偶联标记
一般来讲,偶联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC, RRX, TR, PE)和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于western blot和ELISA,常用的二抗是酶标二抗,而细胞或组织标记实验(组织免疫化学,细胞免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。
(6)抗体的纯度
亲和层析纯化的抗体一般更受欢迎,因为这些产品的纯度更高,产生的非特异性背景也少。但是有些情况下也要考虑到纯化过程中损失的IgG部分,因为其中含有亲和力高的抗体,尤其是当目的抗原存在的量较小的时候。
目前,绝大多数的IgG纯化使用Protein A、Protein G亲和层析,它们是来自于不同微生物的蛋白质,对于IgG具有特异性的亲和作用,而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合,因此具有极高的选择性。通常,仅凭Protein A、Protein G一步亲和层析就可达到90%的纯度。但是Protein A、Protein G又有什么不同呢?该如何选择呢?
1Protein A
Protein A是金**葡萄球菌表面的蛋白,分子量42kDa,有5个不同的结构域可以结合IgG的Fc片段,具有很强的特异性亲和力,每个Protein A分子至少可以结合两个IgG分子。同时,IgA、IgM或者IgE也有可能和Protein A结合。
nProtein A:天然Protein A,无动物来源组分,载量约30mg人IgG/ml。
rProtein A:重组Protein A ,C-端新增一个Cysteine,可以单一位点定向偶联于琼脂糖基架上,降低与抗体接触的空间位阻,提高了载量,约50mg人IgG/ml。雅心重组蛋白A为本公司自主研发产品,非抗体柱纯化,产品中无任何其它抗体如IgG等的污染;pH耐受范围广,可耐受05 M NaOH和05M HCl 处理,不降解,抗体结合能力不变。
2 Protein G
Protein G并不是我们熟知的G Protein(细胞表面G蛋白), 而是G族链球菌的细胞表面蛋白,分子量25kDa,和IgG的Fc区域特异性结合,还能以低亲力与Fab区域特异性的结合,但不与IgA和IgM结合。相比于Protein A,Protein G可以更广泛、更强地、与更多类型的IgG结合,但是载量却较低,约20mg人IgG/ml。
Protein A和Protein G的多个结构域可与IgG结合
Protein A 和 Protein G对于不同物种和亚型的IgG的亲和力如下表;
Protein A与Protein G有何不同?如何选择? - 知乎 (zhihucom)
:超级无敌大蜗牛:https://wwwjianshucom/p/7968913a8432
如何选择一抗和二抗? - 安必奇生物 (abace-biologycom)
是的,技术上是可以达到的,在皮肤创面修复和愈合中,纤连蛋白可以缩短创面愈合时间并且减轻伤口瘢痕,已经在再生医学中被广泛应用了。再具体一点说,促进伤口愈合的关键物质就是特别引入纤连蛋白的基因片段,它能够促进细胞迅速粘附,铺展,增殖,迁移,从而促进创面修复。大大的赞。
一、类型不同
中国研发的重组新冠疫苗属于重组疫苗。这是一种目前世界各国广泛采用的基因工程重组疫苗技术,比传统的灭活疫苗技术能加快时间。
美国的mRNA-1273疫苗属于mRNA疫苗。这是一种抗新型冠状病毒的信使核糖核酸(mRNA)疫苗,可针对病毒的刺突蛋白发挥作用。
二、作用原理不同
中国研发的重组新冠疫是对病毒的基因片段进行克隆后,再放入细菌体内进行复制和表达。等到有足够量之后,将其提取出来作为抗原,以制备疫苗。
美国的mRNA-1273疫苗其基本原理是,把携带细胞制造抗原蛋白指令的mRNA注入人体,然后被人体的细胞吞噬,细胞内的蛋白质制造工厂便根据指令,产生能刺激机体免疫系统的抗原蛋白,如新冠病毒的S蛋白,后者能刺激机体产生抗体,以抗御病毒。
三、时间与风险性不同
美国的mRNA-1273疫苗相对于中国研发的重组新冠疫苗,由于采用信使RNA技术,可以绕过动物试验阶段,直接进入人体试验,也会节省时间和成本,虽然极为先进,但是相对来说,风险系数也较高。
中新网-美国一款新冠病毒疫苗进入临床试验
凤凰网-中美疫苗同时进临床试验阶段,意味着什么?
纤连蛋白也叫作纤维连接蛋白主要由肝脏和血管内皮细胞生成,并且可以与血纤蛋白、肝素、胶原、DNA以及细胞表面受体结合,而且具有多种细胞生物学功能,广泛参与细胞的迁移、粘附、增殖、止血及组织修复的过程,作用可以概括为以下几点:1创伤修复;2癌症的诊断;3早产预测;4治疗血液系统和心脑血管系统疾病;5用于败血症、休克等急救的辅助治疗。
通过直接涂抹或者仪器导入都可以便捷使用的。由于锦波重组III型人源化胶原蛋白是100%人源化的,氨基酸序列与人体自身的胶原蛋白氨基酸序列特定功能区100%一致,完全没有过去的胶原蛋白活性低且会导致排异反应的情况,因此使用起来特别方便,而且可以其高渗透高吸收性可以快速与机体结合发挥作用。
核酸检测频次不与健康码颜色关联
12月6日,广州举行疫情防控新闻发布会。广州市卫生健康委副主任、新闻发言人张屹在会上明确了核酸检测结果的运用场景,核酸检测频次不与健康码颜色关联,市民按出行、就医需求检测即可。
就医方面,广州市、区各级各类医疗机构普通门、急诊就诊人员凭健康码绿码通行;新入院住院患者及其陪护人员凭24小时核酸检测阴性证明办理入院;发热门诊患者须核酸检测。
出行方面,乘坐飞机、高铁、列车、跨省长途客运汽车、跨省客运船舶等交通工具,须凭48小时内核酸检测阴性证明;对跨省来(返)穗人员开展“落地检”。
重点场所(机构)、重点人群方面,养老机构、福利机构、母婴照护机构等人员密集、脆弱人群多等容易发生聚集性疫情的场所,目前仍实行封闭管理,凭24小时内核酸检测阴性证明进入;快递外卖、口岸交通等风险岗位、重点人员,和发生本土疫情的高风险区域,按照第九版规定频次开展核酸筛查。
据会上通报,12月5日0至24时,广州市新增3371例新冠病毒本土感染者,新增感染者中无症状2262例、轻型和普通型1109例,无重型、危重型患者。广州市当前疫情依然多点、多面、多链,呈现局部聚集与点状散发并存状态。
与此同时,张屹建议,广大市民朋友近期如有非紧急就医需求,请优先选择互联网医院或就近到基层医疗卫生机构就诊。广州已要求具备互联网医院接诊条件的医疗机构,充分发挥远程接诊、非接触就医等优势,不断充实线上诊疗力量,积极开展线上问诊,完善药品配送机制;不断优化发热门诊、呼吸科、儿科、产科等科室线上接诊流程,持续提升在线问诊体验,保障线上号源充足、医务人员在线规范化接诊,最大限度为市民提供可及、快捷、方便、安全的在线咨询、接诊分诊和健康科普服务。
随着广州等多地加紧推动各项疫情防控优化措施落地,加强老年人接种新冠疫苗被多次提及。
张屹曾在12月4日的新闻发布会上透露,本轮广州疫情报告的本土感染者中,80岁及以上的老年人有656人,其中未接种过新冠疫苗的有302人。目前,全市80岁以上老年人新冠疫苗首针接种率仅为527%,这说明还有相当部份的老年人尚未完成疫苗接种,老年人现有疫苗接种率尚未形成足以抵抗重症和死亡的屏障,提高老年人接种率非常迫切,也十分必要。
广州市疾病预防控制中心原主任、流行病学主任医师(二级)王鸣在今日的会上表示,由于老年人本身的免疫能力下降,对病毒的抵抗力比年轻人低,且老年人群大多数都伴有基础性疾病,如糖尿病、高血压、肿瘤等,即使是目前致病性减低了的新冠病毒株感染后,也会成为压垮老年人健康的最后一根稻草而容易发生重症甚至死亡。还有一个重要原因,目前进入冬季,正是呼吸道传染病高发季节,流感、细菌性肺炎等都是针对老年人群的常见且重要的疾病,如果因为没有接种新冠疫苗而发生新冠病毒感染,而又不幸感染上流感病毒或肺炎球菌,形成了所谓的“叠加”感染效应,老年人群难以承受。
老年人接种新冠疫苗是否会有什么不良反应?
王鸣称,目前国内应用的新冠疫苗有如下研发线路的产品:一是灭活新冠疫苗,与用于儿童接种的脊髓灰质炎疫苗同一研发线路;二是重组蛋白新冠疫苗,与乙肝疫苗为同一研发线路,三是腺病毒载体新冠疫苗,是最新科技成果,全球多国也应用。上述几种疫苗经过严格的检测,都证明是安全的。要说不良反应,也有,主要就是注射部位疼痛,伴有低热、疲倦等一般接种疫苗后共
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