注射用硫辛酸的用法用量

本品可用于静脉注射或肌肉注射。静脉注射应缓慢，最大速度为每分钟50mg硫辛酸。用于肌肉注射，每个注射部位硫辛酸用量不得超过50mg。如需大剂量给药，每个注射部位最大注射量50mg，分数个不同部位给药。本品也可加入生理盐水静脉滴注，如250-500mg硫辛酸加入100-250ml生理盐水中，静脉滴注时间约30分钟。除非有特别医嘱，对严重糖尿病周围神经病变引起的感觉异常的患者，可用静脉滴注给药，每天300-600mg，2-4周为一个疗程。

我在王正平博士的博客里面看到一篇“a-硫辛酸的抗氧化功能浅释”的文章可能对你有帮助，你可以看一下。

导言

a-硫辛酸简称硫辛酸。二十世纪三十年代，人们发现某些细菌的生长需要一种所谓的 “马铃薯生长素”，从那时起，人们知道了硫辛酸的存在。1957年，这种化合物被成功提取并正式命名为硫辛酸，但直到1998年，硫辛酸的特性才被详细地了解。与此同时，人们也越来越关注和认同自由基引起衰老的理论。硫辛酸强大的抗氧化作用由此迅速为人所知，并对人类的健康产生了重大影响。

目前，硫辛酸作为唯一的双溶性（既溶于脂又溶于水）强抗氧化剂，已经成为美国药品监督管理局批准的膳食补充剂之一。在许多国家，硫辛酸可以作为食物补充剂来使用。例如，2004年6月，日本厚生劳动省将硫辛酸作为食品添加物加以管理，随后，日本市场上以硫辛酸为功能因子的食品、饮料、保健品便层出不穷。在欧洲，硫辛酸早已作为II型糖尿病的处方药（特别针对糖尿病的各种并发症）而被广泛地使用，例如德国Stada公司出口到中国并在临床上经常使用的“奥力宝”静脉注射液就是其中的一种。

那么什么是硫辛酸？它具有什么样的功能？怎样把它应用到食品中？其抗氧化的效果又如何呢？

硫辛酸简介

硫辛酸 (英文缩写ALA)，其化学名称: 1,2-二硫戊环-3-戊酸 (C8H14O2S2)，

硫辛酸为短链脂肪酸衍生物，含有2 个硫原子，其手性中心位于第三个碳原子 () 的位置上(R/S-构象)。

硫辛酸二硫戊环上的两个硫原子之间的化学键连接是可逆的，使得硫辛酸具有超群的抗氧化功能。打开双硫键之后的化合物称为二氢硫辛酸

从外观上看，硫辛酸为淡**粉末，无味。水中室温溶解度为 01%； 熔点： 60-62°C；pH值为 (01%)54–60 （20°C）；堆积密度为300 g/l。

硫辛酸可分为内源和外源两种。人体在通常情况下可以自行合成R(+)-立体异构，它是脂肪酸合成过程的中间产物。人体内的硫辛酸含量通常很低，有证据表明人体内的硫辛酸水平会随着年龄的增长而减少。因此，在年纪越来越大或身体状态不佳时，专家建议补充外源的硫辛酸。

　　硫辛酸的分布

　　动植物组织中硫辛酸通常与蛋白质分子中赖氨酸残基的ε氨基共价结合，以酰胺键的形式存在。硫辛酸含量最高的植物是菠菜，其次是番茄和甘蓝, 在通常的食物中如肉类、动物心脏、肾、肝及肌肉中均含有少量硫辛酸 (< 1mg/kg)。

硫辛酸的功能与应用

通常说来，硫辛酸是一种人体在机能十分活跃的状态下自行产生的体内天然物质，是一种内源性抗氧化剂，由于人体可大量合成并且食物中含有一些硫辛酸，因此，学术上不把它作为维生素归类。 但是，当人体处于代谢功能低下状态（主要是由于年龄、疾病和外界不利因素所造成），硫辛酸在体内的合成便受阻，以至达不到体内代谢所需要的数量。人体中硫辛酸的缺乏可导致衰老的加速、代谢的紊乱等多种症状。因此，在膳食中追加适量的硫辛酸可以达到帮助人体中和人体内部的衰老因子——自由基的效果，充足的硫辛酸可以使人体的代谢状态趋于活跃。

相对于其它大部分抗氧化剂只能提供细胞外的抗自由基功效，硫辛酸兼具的脂溶性和水溶性特点，使其可以很容易的被吸收并通过细胞膜，这样不仅在细胞外部发生作用，还可在细胞内部起作用，同时也使其具有透过血脑屏障的功能。硫辛酸的双溶性使其功效远远高于其它抗氧化产品，如维生素C、E 等；同时，硫辛酸可以与体内的金属离子发生鳌合反应， 阻止金属离子对人体的损伤，减少大脑、心脏和睾丸的过氧化反应。作为再生性的内源抗氧化物，硫辛酸还可通过多种反应模式与不同的抗氧化物相互作用；例如，它可以通过其降解形式激发谷胱苷肽（GSH）、VC、VE的非酶再生的作用，使得人体代谢系统中的各类抗氧化剂均处于活跃状态。

硫辛酸在减肥食品中的应用

由于硫辛酸可以活化细胞内线粒体的代谢速度并促进能量的生成，在减肥食品和体育运动营养品中（过度训练会造成运动员体内产生大量的自由基）对硫辛酸的应用日益增多。中老年人的代谢水平随着年龄的增加不断降低，通过口服硫辛酸来维持代谢水平、保持健康体态是百利而无一害的。有效地服用方法是每天做有氧运动20分钟左右，并搭配规律的饮食，坚持每日服用100mg的硫辛酸，会取得惊人的减肥效果。

硫辛酸在化妆品中的应用

关于硫辛酸在防治皮肤的放射性伤害(如阳光、X-射线等)、防治皮肤干燥等方面存在着大量的报道。除去其强大的中和自由基的能力外，其阻止因葡萄糖附着在肌肤真皮的胶原蛋白上导致胶原蛋白因失去弹性而变得粗硬的老化过程的功效也是有口皆碑的。因此，通过酯化的技术处理，在化妆品中应用硫辛酸已成为一种趋势，现举例如下：

1、在调理营养型化妆品中用量002%～02%；

2、治疗和防治粉刺，加入05%～20%能抑制皮脂分泌；

3、在护发产品中，用量005%～02%，能抑制头屑并刺激毛发生长；

4、在美白产品中，用量为2%～5%，因a-硫辛酸能俘获氧自由基而具有抗氧性，它的增白性就基于此；

5、在排毒型产品中，用量15～55%，可穿透表皮细胞，螯合体表的汞，进而通过血液循环排出体外；

6、在唇膏，眼霜和保湿防皱产品中用量05～25%,具有强的保湿润肤作用。

硫辛酸调节血糖的功能以及对糖尿病及其综合症的治疗和改善作用

在人体代谢过程中，丙酮酸脱氢酶系统处于三羧酸循环的核心部位，控制人体的能量代谢。没有这个过程的顺利进行，人体就无法将摄入的能源物质（如碳水化合物等）转换成能量。由于硫辛酸是线粒体复杂酶系统中的一个十分重要的辅酶，它参与a-酮戊酸类（如丙酮酸、 a-酮戊二酸）及其支链的脱碳反应。而这类脱碳反应是人体糖代谢的关键步骤。因此人体内硫辛酸的存在与否以及其数量的多少直接关系到人体的能量转化过程的效率并影响糖代谢的过程。糖尿病的主要特征是高血糖，血糖浓度的降低是需要通过一系列酶反应过程进行的。硫辛酸可以促进血糖的吸收，使其进入肌肉系统；同时硫辛酸还可以加强糖酵解反应进而加强糖的利用、抑制糖质新生、增加胰岛素的敏感性。硫辛酸不仅参与葡萄糖代谢过程，更能使胰岛素介导的葡萄糖在机体组织的分布增加30％以上，在与GTF（葡萄糖耐量因子吡啶酸铬）联合使用时，可增加60％以上，显著改善和逆转胰岛素抵抗，表现出对高血糖的控制和糖耐量减低者的逆转。有结果表明，无论是单独使用还是与药物或胰岛素联合使用，都能有效抑制和阻断“蛋白质糖基化”等过程。它可以很容易被吸收并透过细胞膜在细胞内部起作用。

硫辛酸是在人体全身细胞中存在的一种脂肪酸衍生物，由于其强大的抗氧化功能，它可以降低神经组织的脂质氧化现象，阻止蛋白质的糖基化作用；且可抑制醛糖过原酶，因而可阻止葡萄糖或半乳糖转化成为山梨醇。硫辛酸可以预防糖尿病、控制血糖及防止因高血糖造成的神经病变，所以被大量用于治疗糖尿病的神经病变上。目前，在欧、美、日本等很多国家，硫辛酸已经被广泛的应用于预防和治疗糖尿病的并发症。

糖尿病的并发症多由长期的高血糖、高血脂、血液高凝高粘、内分泌失调、高胰岛素血症，尤其是动脉硬化和微血管病变引起的，上述症状的直接结果是细胞中大量自由基的产生而进一步导致细胞活性的丧失。常见的并发症有：糖尿病酮酸中毒、非酮症性高渗性昏迷、糖尿病乳酸性酸中毒、糖尿病性心脏病、糖尿病性脑血管病变、糖尿病性神经病变、糖尿病性肾病、以及糖尿病引起的多种感染，其中以视力差、手脚尖麻木、肢端坏疽为初期较常见症状。试验结果表明，糖尿病人细胞中导致衰老的自由基比健康人多得多。通过口服适量的硫辛酸不仅可以辅助降糖，还可以达到中和自由基、预防和改善并发症的目的。

目前我国市场上既能够辅助降糖、同时又能够抗击糖尿病并发症的保健食品为数不多，江苏同禾药业生产的“唐苹片”是一款配方及其独特的保健食品。它既能够在相对短的时间内降低血糖，又没有药物降糖给身体带来的副作用，同时还能够提高肌体免疫功能，预防并发症的发生和改善并发症的状况。由于应用超级抗氧化剂硫辛酸并配合各族维生素的使用，使唐苹片还具有全方位抗衰老的功能、祛斑和减肥功能。因此，唐苹片不仅适用于糖尿病患者，对潜在糖尿病人群、肥胖人群、老年人来说，都是一款不可多得的抗衰老产品。

硫辛酸的其它应用

除了上述功能外，硫辛酸对肝病（包括由毒素、病毒如甲、乙、丙型肝炎、酒精和药物造成的肝损伤）、眼病（包括黄斑变性和白内障）、冠状动脉病变和充血性心力衰竭、静脉曲张、脚抽筋、毛细血管脆弱、男性性功能障碍等疾病都有一定的治疗效果。而且，长期口服可以缓解哮喘、过敏、鼻炎、麻疹、关节炎等症状保护DNA、细胞膜、脂质、蛋白质等不受自由基损害，达到防止细胞突变及预防癌症的目的。

突发性耳聋又称特发性暴聋，是指听力突然减退，1～2日即可达到耳聋最高峰乃至全聋。大多数为单耳发病，多由全身或局部因素所引起的一种感觉神经性耳聋。少部分病人伴有头晕。

[临床表现]

1．耳聋：听力突然明显减退(多为单侧耳)，大部分病人伴有耳鸣，部分病人有耳内发闷、胀满及阻塞感。

2．发病原因：多数病人无明显发病原因，不少是发生在睡眠当中，于起床时自感耳鸣、耳聋。一些病人有较明显的劳累、情绪过于激动、精神紧张及感冒病史，这些可能与发病有一定关系。

3．眩晕：有一少部分病人有耳聋同时伴有眩晕，自觉有旋转感，常伴恶心、呕吐，多于发病一周左右眩晕减轻，耳鸣、耳聋无好转，伴有眩晕者听力损失多较重，也不容易恢复。

[诊断]

1．听力突然明显下降，以单侧耳聋多见，部分患者可伴眩晕，电测听检查为感音性耳聋。

2．鉴别：单纯的突发性耳聋病较易诊断，由于症状突然发作，听力损失明显，多为单耳发病，故不容易与其它耳聋相混；但如果伴有眩晕的病人则应与很多病相鉴别，此时应及时到医院请专科医生检查，因为鉴别眩晕症状，需要借助于各类仪器，所以不是病人自己能够办到的。

[治疗]

突发性耳聋的病人，如果听力下降不太明显，症状比较轻微的，可以在医生检在后，经医生同意，在家治疗；如若症状显著，耳聋严重，甚至伴有眩晕者，则需尽早住院治疗。

1．西医药治疗：多采用静脉给药结合肌肉注射的疗法，也可选用血管扩张剂加入葡萄糖溶液中静脉点滴，同时配合维生素B1、B2肌肉

注射。或配以中药针剂，如川芎嗪、复方丹参注射液、当归注液等，滴注。

2．中医药治疗

(1)中医认为突发性耳聋多为气滞血淤，耳部经络被淤血所阻塞，清阳之气不能上达于耳窍，使得耳部的正常生理功能减退，从而发生了耳鸣、耳聋等表现。

治法：活血祛淤，通络开窍。

方法：柴胡6克、香附10克、川芎10克、当归10克、赤芍10克、路路通10克、菖蒲10克、生甘草6{克。伴有眩晕加菊花10克、双勾藤10克、夏枯草6克。体质虚弱者加党参10克、炙黄芪10克。情绪易急躁者加白芍10各、灵磁石30克。

(2)针灸治疗或做体外反搏治疗均有辅助作用。

[预防与调养]

1．突发性耳聋的病人应在家安心静养，尤应避免接触噪声或过大的声音。保持家庭环境整洁，病人心情舒畅，才有利于疾病恢复。

2．预防感冒，有一部分突发性耳聋的病人可能与感冒有间接关系，故预防感冒则可减少一个发病因素。

3．注意勿过度劳累，做到起居有时，饮食定量。本病多发于中年人，故中年人更应注意这一点。

4．情绪稳定，忌暴怒狂喜，因为这些均可使人体内神经体液调节失去平衡，造成耳部血循环障碍，发生耳聋。

　　硫辛酸是一种抗氧化效果胜过维生素A、

　　C、E，并能消除加速老化与致病的自由基的物质。同时

　　硫辛酸还有多种对人体有益的作用。 一、辅助治

　　疗2型糖尿病改善胰岛功能与葡萄糖代谢。 保护神

　　经细胞。硫辛酸可使糖尿病患者的神经病变明显减轻。

　　对尚未出现神经病变的糖尿病患者有预防保护作用。

　　二、硫辛酸可预防白内障，因为白内障是由于眼睛

　　内的晶体受到氧化造成的。 三、治疗肝坏死及乙

　　肝、丙肝，硫辛酸可结合并分解肝内毒素，减轻肝炎症

　　状，恢复肝功能。 四、预防肌肉损伤，加速肌肉

　　复原硫辛酸 五、改善艾滋病患者的血液状态HIV患

　　者的抗氧化防御系统通常较薄弱。由于抗氧化剂缺乏，

　　所以在氧化剂刺激病毒时无法防止病毒繁殖。此外，硫

　　辛酸还有预防心血管疾病、老年性痴呆、帕金森氏病、

　　中风、糖尿病等作用，并有益于皮肤美容，延缓人体各

　　重要器官的衰老。

　　我国的基因工程开始造福人类，早在二十世纪七十年代，欧洲人就知道天然的α—硫辛酸可以阻断黑色素在人体中沉积。但天然的α—硫辛酸来源有限，300公斤菠菜只能提取50mg，化学合成的α—硫辛酸的活性很低，并存在一定的毒副作用，所以一直以来未得到广泛的应用。

　　中科院生命科学院上海宇骏高科集团公司下属舒泽生物科技研究所，通过基因工程克隆技术，发酵含有α—硫辛酸基因的工程菌，提取了生物活性与从菠菜中提取完全一样的硫辛酸。

　　大量的科学实验证明，α—硫辛酸是一种类似维他命的万能超神奇抗氧化剂，在体内经肠道吸收后，进入人体各种细胞的深处，能左右细胞运作，是细胞制造能量不可或缺的成份，在细胞内外抵抗自由基，加强细胞的修复能力，消除加速老化与治病的自由基的物质。

　　美国加州大学的帕克博士发现，α—硫辛酸最为神奇的是，它能以“自由体”的身份，渗透到细胞的任何一个部分，在其它抗氧化剂短缺的时候为之“代打”（即体内缺乏VC或VE时，强烈阻断黑色素在皮肤中的沉着，可以临时接手它们的工作，且还能大大增强维生素的作用）；另外它能增强免疫系统，分解肝内毒素，减轻肝炎症状，恢复肝功能；还具有抗突变、防治动脉粥样硬化、抗衰老等多种作用。

　　引领未来的上佳健康营养品之一

　　由于人体中的硫辛酸其实非常少量，再加上会随着年龄而减少，所以一定要从体外摄取才行。马铃薯、菠菜、花椰菜、番茄、红萝卜等蔬菜及肝脏等肉类虽然含有少量的硫辛酸，其中以菠菜含量最高。但只吃这些东西对硫辛酸的摄取速度还是太慢（30克的菠菜也仅含0005毫克的硫辛酸，提取50毫克α—硫辛酸需要300公斤菠菜），因而才有了 营养补充剂的出现。总结一下，硫辛酸到底有什么具体功效呢？

　　1、强化肝功能：硫辛酸具有可以强化肝脏活动的机能，因此早期也被当作是食物中毒或是金属中毒的解毒剂来使用。

　　2、保护身体：在欧洲特别针对硫辛酸作为抗氧化物的部分来做研究，发现硫辛酸能保护肝脏及心脏的损害、抑制体内癌细胞的发生，并缓和体内因发炎所引起的过敏、关节炎及气喘等。

　　3、养颜美容抗衰老：硫辛酸具有令人惊讶的抗氧化能力，能将造成肌肤老化的活性氧成分去除，且由于比维他命E的 分子还要小，再加上又是兼具水溶性及溶脂性，所以皮肤吸收相当容易。

　　4、减肥：这是在日本引发风潮的最大原因，硫辛酸当作抗氧化物质，甚至比目前走红台湾的葡萄籽（OPC）的效果还要好，是日本及美国都已知道的事实。但是日本强调硫辛酸是中老年肥胖的救世主，对于男性的减肥效果能在短短半年内呈现，而对于皮下脂肪较厚的女性，虽然在几个月要呈现出相同的效果很难，但长期坚持服用也可以有相同的效果 。

　　另外，硫辛酸也被使用在复方的保肝产品上（特别是经常喝酒的人群），作为肝细胞修复所必要的营养素；健康的年轻人虽然也应该补充抗氧化剂来作为保养，不过并不完全需要补充硫辛酸（工作压力过大和亚健康群体应该选择）；中年45岁以后，人体合成硫辛酸的能力几乎没有，因此，补充足够的复合硫辛酸，不仅可以预防慢性疾病，还能在抗氧化、抗衰老方面有明显改善。单方硫辛酸人体不能完全充分吸收，因此，硫辛酸一般制成针剂（在医院注射使用），制成复方制剂则作为防治疾病和修复早中期病理损伤的功能性营养制剂，专家认为，硫辛酸与绞股蓝皂甙和葡萄糖耐量因子吡啶酸铬联合运用，可以显著提高硫辛酸的抗氧化活性。

Beneficial effects of creatine, CoQ10, and lipoic acid in mitochondrial disorders

肌苷，辅酶Q10和硫辛酸对线粒体疾病的有益作用

作 者M Christine Rodriguez;Jay R MacDonald;Douglas J Mahoney;Gianni Parise;M Flint Beal;Mark A Tarnopolsky

刊 名Muscle & nerve

出版日期2007

卷 号Vol35

页 码235-242

doi101002/mus20688

影响因子2456（2007）  2283（2015）

摘要： 线粒体疾病具有共同的细胞后果：（1）ATP产生减少；（2）增加对替代厌氧能源的依赖；（3）增加活性氧的产生。本研究的目的是确定联合治疗的效果（肌酸一水合物，辅酶Q 10，以及针对上述细胞后果的硫辛酸，使用线粒体细胞病患者的随机，双盲，安慰剂对照，交叉研究设计，针对多个结果变量。 3例患有线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作（MELAS），4例存在线粒体DNA缺失（3例慢性进行性眼外肌麻痹患者和1例Kearns-Sayre综合征患者），还有9例其他非线粒体疾病分为前两组。 联合疗法可降低所有患者组的静息血浆乳酸和尿8-异前列腺素，并减轻峰值踝背屈强度的下降，而仅MELAS组观察到较高的无脂肪量。一起，这些结果表明，针对线粒体功能障碍的多个最终共同途径的联合疗法可有利地影响细胞能量功能障碍的替代标志物。将来需要在相对均一的人群中进行更大样本量的研究，以确定这种联合疗法是否影响功能和生活质量。

线粒体疾病代表一组影响线粒体能量传导的疾病，其特征是临床，生化和遗传异质性。 18 尽管表型表达差异很大，但大多数患者合并有乳酸性酸中毒，中风或癫痫发作，头痛，色素性视网膜炎，上睑下垂，运动耐力低下，眼肌麻痹，心肌病，神经病和视力减退。 16 ， 29 ， 38

线粒体功能障碍导致许多细胞后果，包括：（1）ATP生成减少；（2）增加对替代厌氧能源的依赖；（3）增加活性氧（ROS）的产生。 16 ， 37 没有疗效的治疗线粒体疾病，大多数策略的目的是为了缓解上述蜂窝后果。 16 ， 18 上的患者的线粒体疾病的治疗策略的报告已经检查的单一化合物的效果，如辅酶Q 10（辅酶Q 10） 2 ， 4 ， 21 或肌酸（CRM）。 13 ，  14 ，  38 基于的概念，即线粒体功能障碍导致一些细胞的病理生理学后果，  33个 为线粒体疾病大多数治疗策略具有相对于单一疗法使用的联合治疗（或治疗“鸡尾酒”）。某些研究已经评估了针对上述三种方法中的一种以上的联合疗法的疗效。然而，这些是任何一种情况下报告，  8 ，  25次 开放试验中，  1 ，  19 ，  20 ，  27 ，  32 或回顾性研究。 26

基于线粒体疾病人体试验的潜在功效证据或人体试验或体外研究的证据显示拟议的化合物可以缓解线粒体功能障碍的一种或多种最终常见途径，我们建议评估联合用药的潜在疗效下列化合物：（1）CrM（替代能源 36 和抗氧化剂 30 ）； （2）α-硫辛酸（抗氧化剂 17 和可增加CrM的吸收 6 ） ；（3）辅酶Q 10 [作为抗氧化剂 21 并绕过电子传输链（ETC） 19的配合 物I ]。我们在这里报告了一项随机，双盲，安慰剂对照，交叉试验的结果，该试验研究了这种靶向联合治疗性鸡尾酒联合CrM，CoQ 10和α-硫辛酸对线粒体细胞病变患者的影响。

患者： 从麦克马斯特大学的神经肌肉和神经代谢诊所招募了17位具有明确或可能的线粒体疾病的患者。结合临床症状，空腹血清乳酸浓度，肌肉活检结果（红色的纤维状或细胞色素 c 氧化酶阴性纤维）和线粒体DNA（mtDNA）分析。仅8、9和13号患者未鉴定出DNA突变，对于线粒体神经胃肠道脑病的患者，仅进行确认试验（胸苷升高，胸苷磷酸化酶活性降低）；然而，他们的乳酸浓度升高，组织学异常，运动耐力低下，有氧能力低，被认为具有“可能的线粒体细胞病变”。一名患者由于个人原因未完成研究的一部分；因此，该患者的数据被排除在分析之外。最终分析基于16位患者（10位女性和6位男性），根据他们的诊断分为三组。表中显示了患者人群的特征 1 。 第一组包括三位线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作的患者（MELAS组）。第二组包括三名被诊断为慢性进行性眼外肌麻痹（CPEO）的患者和一名被诊断为Kearns-Sayre综合征（KSS）的患者，所有患者均在肌肉来源的mtDNA中被检测出缺失（CPEO / KSS组）。第三组包括各种线粒体疾病的患者：六名线粒体细胞病变患者，两名Leber遗传性视神经病变患者和一名线粒体神经胃肠道脑病患者（其他组） 。该研究获得了我们机构伦理委员会的道德批准，所有患者均提供了知情的书面同意。

CPEO，慢性进行性眼外肌麻痹；细胞病变，线粒体细胞病变；KSS，Kearns–Sayre综合征；LHON，Leber的遗传性视神经病变；MELAS，线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作；MNGIE，线粒体神经胃肠道脑病（无胸苷磷酸化酶活性，胸腺嘧啶核苷水平高）。

设计/干预。

患者参加了一项随机，双盲，安慰剂对照，交叉研究，其中每个参与者均接受了2个月的治疗和安慰剂治疗，两次试验之间有5周的清除期。治疗阶段包括3 g CrM + 2 g葡萄糖+调味剂（新碱；加利福尼亚州帕洛阿尔托的Avicena），300 mgα-硫辛酸（Tishcon，Westbury，纽约）和120 mg CoQ 10（Qgel； Tishcon）每天的0：900和21:00。在安慰剂阶段，将外观相同，品尝相同的粉末（5 g葡萄糖+调味剂； Avicena）和凝胶胶囊（大豆油； Tishcon）用作安慰剂。

禁食4小时后，两个试验的患者在大约每天同一时间（2-3小时内）在每个干预阶段之前和之后完成测试。

测量。

仅在首次访问时记录参与者的身高和体重。所有其他访视均采取了其他所有结果指标。参与者使用定制的力传感器设备进行了握力，踝背屈（关节角度为90°）和膝盖伸展强度测试，数据已直接输入包含数据采集和分析软件的计算机中，如前所述。 38 对于所有力量测量，参与者都在右侧进行测试，并根据手的大小进行个性化设置，并在每次访问之间保持恒定。为了达到峰值强度，参与者进行了3个5s试验，相隔约30 s。记录具有最佳结果的试验值。参与者还进行了1分钟的等距握力和踝背屈疲劳测试（9秒钟工作时间：1秒钟休息周期）。使用肺活量计（Koko； PDS Instrumentation，路易斯维尔，科罗拉多州）进行肺功能测试，包括1秒内的强制肺活量和强制呼气量。每位患者每次访视均至少完成两次肺活量测定，以确保该值与他们的首次尝试一致。进行生物电阻抗（Prism BIA 101A； RJL Systems，Clinton Twp，密歇根州）以确定身体成分。

静脉血液采样和尿液采集。

从肘前静脉将全血收集到预先冷却的，装有肝素（用于乳酸分析）或EDTA（用于测定CoQ 10）的真空管中，并以2500 rpm离心10分钟。将血浆储存在-80℃。每位患者都提供了尿液样本样品，将其约10 ml快速冷冻并保存在-80°C下用于肌酸，肌酐，8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-OHdG）和8-异前列腺素的后续分析（ 8-IsoP）。

乳酸

使用YSI 2300 Stat Plus乳酸分析仪（YSI，Yellow Springs，俄亥俄州）测定血浆乳酸浓度。乳酸的批内和批内变异系数分别为21％和17％。

辅酶Q 10。

使用电化学检测器通过高效液相色谱（HPLC）测定血浆CoQ 10浓度。将血浆（05 ml）等分到装有1 ml 1-丙醇和05 ml辅酶Q 9的10 ml真空容器中，混合5分钟，然后在300  g下 离心5分钟。使用022μM注射器过滤器过滤样品，然后将其转移到色谱瓶中，以进行HPLC直接分析。将辅酶Q 9添加到混合物中以作为内标，作为辅酶Q 9的水平在人体血液中微不足道。将所得样品注入装有3μm填料的反相不锈钢色谱柱（150×3 mm）RP‐C18中，该色谱柱带有一个电化学检测器（ESA，贝德福德，马萨诸塞州），该检测器连接到带有单个电极的保卫室（5020型） ； E = +350 mV）和带有双电极的库仑分析池（5011型； E1 = -400 mV，E2 = +300 mV）。使用混合和脱气的甲醇，1-丙醇和乙醇（70:20:10）的流动相，其中含有50 mM乙酸锂作为电导盐，流速为05 ml / min，总运行时间少于15分钟 首先通过还原泛醌（E = -400 mV），然后氧化所得泛醇（E = +300 mV）测量辅酶Q 10。辅酶Q 10和辅酶Q 10 H 2在最后一个电极上以最高灵敏度检测到。标准曲线的相关系数为0997。变异系数确定为<2％。

肌酸和肌酐。

使用HPLC测定尿液中的肌酸浓度，肌酐和肌酸：肌酐的比例。将尿液（1 ml）等分到微量离心管中，并以10,000 rpm离心10分钟。使用ddH 2 O 将尿液上清液稀释至十分之一稀释（01 ml上清液至09 ml ddH 2O）。使用冷藏自动进样器将稀释的尿液上清液保持在10°C。使用Hewlett Packard LC1100系列HPLC（Agilent，Mississauga，Ontario），将紫外检测器设置为λ= 210 nm，将样品注入250×46 mm C18 Phenomenex10-μHydro-RP 80色谱柱中。Hewlett Packard LC1100数据分析程序会生成校准曲线并分析所得数据。流动相是使用氢氧化钾以10 ml / min的流速将磷酸二氢钾（20 mM）调节至pH 50。变异系数为31％。

8-IsoP。

按照制造商的说明，使用商业酶联免疫吸附测定法（MediCorp，蒙特利尔，魁北克）测定尿中的8-IsoP浓度。标准曲线的相关系数为0988。变异系数为105％。8-IsoP值相对于肌酐（g）表示。

8-OHdG。

如前所述，使用HPLC测定尿液中8-OHdG的浓度。 3  8-OHdG值相对于肌酐（g）表示。

统计。

使用三向（组×处理×时间）或双向（组×处理）重复测量方差分析（ANOVA）进行统计分析。鉴于先前的假设，即由于三种成分中的每一种都具有抗氧化特性，因此联合疗法可减少乳酸盐并降低氧化应激，我们对氧化应激标志物使用了单尾检验。当发现重要结果时，将运行Tukey HSD事后测试。所有分析均使用Statistica v。5软件（StatSoft，Tulsa，俄克拉荷马州）进行。 P  <005的值被认为具有统计学意义。所有数据均以平均值±SD给出。

辅酶Q 10和肌酸：肌酸酐。

如预期的那样，与安慰剂阶段相比，联合治疗的血浆辅酶Q 10和尿肌酸：肌酐的比率明显更高。联合治疗后（194±089μg/ ml）的血浆CoQ 10浓度比安慰剂（071±024μg/ ml）高172％（ P  <005;  n  = 14），肌酸：肌酐比高600％ （245±208）比安慰剂（035±020）（ P <005）。

血浆乳酸盐。

在血浆乳酸中发现显着的治疗×时间相互作用（ P  <005，单尾），在联合治疗阶段血浆乳酸浓度较低，在安慰剂阶段未观察到效果（图 1 ）。

  P  <005，单尾。COMB，联合疗法；CPEO，慢性进行性眼外肌麻痹；KSS，Kearns–Sayre综合征；MELAS，线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作。黑柱，联合疗法；开列，安慰剂。

观察到FFM，TBW和％BF的显着三向相互作用（组×治疗×时间）（ P  <005）（图 2 ），FFM和TBW升高，％BF降低仅对MELAS集团。

（A） 三组中每个治疗阶段之前和之后的无脂质量（FFM）， （B） 全身水（TBW）和 （C） 身体脂肪百分比（％BF）。  P  <005；  P  <005，单尾。COMB，联合疗法；CPEO，慢性进行性眼外肌麻痹；KSS，Kearns–Sayre综合征；MELAS，线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作。黑柱，联合疗法；开列，安慰剂。

肺功能。

在1 s内未观察到治疗，组或时间对强制肺活量或强制呼气量的影响（表 2 ）。

表2 肺功能（ n  = 11）。

CPEO，慢性进行性眼外肌麻痹；FEV 1，用力呼气量1 s；FVC，强制肺活量；KSS，Kearns–Sayre综合征；MELAS，线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作。

强度措施。

尽管对于每个阶段的结束，无论采用何种治疗方法，峰值握力都降低的趋势不明显（ P  = 0054），但对于峰值握力的处理，组别或时间均无影响。对于握把或脚踝背屈疲劳（表示为峰值疲劳或区域疲劳）或峰值伸膝力量，也没有任何治疗，组或时间效应。但是，观察到踝背屈峰值强度存在显着的双向相互作用（治疗×时间），安慰剂后，踝背屈峰值强度显着下降（从3116±1368 Nm降至2906±1331 Nm），但未观察到组合治疗（从2932±1378 Nm到2931±1205 Nm）（ P <005， n  = 16）。

尿液8-OHdG和8-IsoP。

尿8-OHdG没有治疗或组作用；然而，与安慰剂相比，联合治疗后降低8-OHdG /肌酐的趋势无统计学意义（分别为3,47205±1,88306 ng / g肌酐与4,165±1,98500 ng / g肌酐； P  = 0065）。观察到8-IsoP的治疗效果，因此与安慰剂相比较，联合治疗后观察到较低的尿8-IsoP /肌酐含量（分别为6,57247±3,35664 ng / g肌酐与7,46343±3,15523 ng / g肌酐。 ； P ＜005）。

CrM，CoQ 10和硫辛酸 的联合治疗 可降低静息乳酸浓度，防止峰值踝背屈强度降低和氧化应激降低，这可通过尿中8-IsoP排泄和尿液的显着减少来体现。 所有组中8-OHdG排泄的方向性趋势。此外，在MELAS组中，患者的身体成分发生了积极变化（FFM和TBW增加，％BF降低）。联合疗法对肺功能，峰值握力或膝盖伸展力量，或握力或脚踝背屈百分比或区域疲劳没有影响。

从突变线粒体疾病的结果导致在氧化磷酸化的缺陷，导致在nonaerobic能源的依赖性增加 16 ， 38 和一个升高的血浆乳酸浓度。 16 ， 29 ， 38 无论是磷酸肌酸（PCR）系统，腺苷酸激酶/ AMP脱氨酶，或糖酵解/糖原分解可以被用来提供ATP; 但是，由于对糖酵解/糖酵解的依赖性增加，导致乳酸升高 38 CrM被包括在本研究中用于增强PCr系统的联合治疗中。联合治疗后尿肌酸：肌酐的升高和血浆乳酸浓度的降低间接表明联合治疗中的CrM成分可能为肌肉收缩提供了另一种厌氧能源。

从线粒体疾病患者的肌肉中观察到总肌酸 36 和PCr  14的 水平较低，进一步支持了在此类患者中补充CrM的潜在益处。Kornblum等人的最新研究。 14 研究了补充CrM对CPEO或KSS患者肌内PCr的影响。相反，先前在健康受试者中，观察到的结果 6 ， 11 没有导致CrM工作在补充尽管肌酸的血浆浓度显著随着由磷- 31核磁共振光谱法测量增加肌内肌酸浓度。 14 当前研究的局限性在于未在大脑或骨骼肌中测量肌酸或PCr含量。然而，伯克等。 6 表明，在健康志愿者中，将CrM与硫辛酸联合使用时，肌肉PCr和总肌酸浓度显着高于单独补充CrM时。 因此，硫辛酸在我们的患者中可能会增加CrM的摄取，从而导致观察到的静息血浆乳酸浓度降低。

乳酸浓度较低的另一种或其他解释可能是联合治疗改善了线粒体ATP的产生。辅酶Q 10是ETC中的电子受体，它将电子从络合物I和II转移到络合物III。 16 ， 18 ， 33 的CoQ的目标10的补充是旁路缺陷在ETC最大化ATP产生。 16 一项使用来自线粒体细胞病变患者的培养淋巴细胞的研究发现，结合CoQ 10的联合疗法可增加线粒体ATP的产生，其中约49％归因于CoQ 10。 19 相比之下，人类研究的结果不是决定性的，对于一些报道报道辅酶Q的有益效果10在降低血浆休息乳酸浓度患者的线粒体疾病， 1 ， 2 ，而另一些则没有。 19 ， 20 ， 38 不同于以往的报道中，病人在我们的研究也给予硫辛酸。 硫辛酸天然存在于线粒体内，是丙酮酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶的重要辅助因子。 33 硫辛酸用作有效的抗氧化剂 31 ， 33 ，并且降低氧化应激在健康志愿者的标记。 17 硫辛酸对ROS的清除作用增加，可能会减慢线粒体疾病中的“恶性循环”，在这种情况下，ROS的产生会导致mtDNA突变，从而加剧氧化磷酸化的缺陷，从而导致更多的ROS产生 。 16 因此， 辅酶Q 10与硫辛酸结合使用，可能具有增加ATP产生的能力，从而导致替代能源的利用率下降，血浆血浆乳酸浓度降低。

安慰剂治疗后，联合疗法减轻了峰值踝背屈强度的下降。据推测，在联合治疗CRM的成分会导致与安慰剂相比改进的强度值，如CRM有被证实可以改善患者强度与线粒体疾病 35 ， 38 或杜氏肌营养不良症， 34 和中老年健康志愿者。 5 鉴于我们没有直接测量肌肉中的肌酸或PCr含量，因此我们不能得出结论说联合疗法中的CrM成分会导致踝背屈峰值强度下降。其他研究表明，使用CoQ可以改善线粒体疾病患者的强度10补充。 4 ， 9

先前的研究表明，补充CrM可以改善人体成分。 5 ， 34 的MELAS组在体本研究中证实的改善的组合物，增加FFM和TBW，和降低的％BF-以下组合疗法; 但是，CPEO / KSS或其他组的患者未见这些改善。与本研究其他两组中代表的其他形式的线粒体疾病患者相比，MELAS患者表现出更严重的临床表型。因此，患有MELAS的患者在本研究中测量的所有变量（包括身体组成）方面都有更大的改善空间。

高水平的ROS和氧化应激与线粒体疾病的病理生理有关。氧化应激的更高水平已报告患者的线粒体疾病与对照组相比 21 ， 39 和患者的线粒体DNA突变更高程度的异质性。 7 联合疗法中的所有三种化合物均具有降低氧化应激的特性。 肌酸在无细胞系统中具有直接的抗氧化特性 15， 并为与多种氧化剂孵育的哺乳动物细胞提供细胞保护作用。 30 辅酶Q 10充当脂质的抗氧化剂和线粒体膜 10 ， 33 并且还可以通过绕过氧化磷酸化中的缺陷来减少ETC的电子泄漏。 10 最后， 补充硫辛酸后，健康志愿者的尿中异前列腺素水平较低 。 17 我们观察到，与安慰剂相比，联合治疗后的8-IsoP浓度更低；但是，仅观察到了8-OHdG含量降低的趋势。异前列腺素是由花生四烯酸的过氧化作用形成的类似于前列腺素的化合物。 22  -  24 它们是化学稳定的，在体内形成的，并且是一个过氧化特异性产物可检测在稳态水平在多种人类组织和体液中的 24 ;  所有这些特征都使8-IsoP被认为是评估体内氧化应激的最可靠标记。 23 ， 24 的8-OHdG由鸟苷残基的羟基化形成，并且经常被用来作为对DNA损伤ROS的生物标志物。 28 ， 39 由于的8-OHdG是用于向所有的DNA，不仅线粒体DNA的氧化损伤的生物标记物，它是可能的核DNA的存在可能掩盖或稀释用于降低氧化性损伤的mtDNA的联合治疗的有益效果。

很少有随机对照试验检查了营养药物在线粒体疾病患者中的作用。那些已经进行了严格的检查，单一化合物的唯一的效果，如CRM的 12 ， 13 ， 38 或辅酶Q 10， 9 已审查。其他的研究，审查的联合治疗效果 1 ， 19 ， 20 ， 26 ， 27 ， 32 没有使用与我们的研究相同的严格研究设计。结果，与这些研究进行直接比较非常困难，特别是当结合不同线粒体疾病人群中检查了不同的化合物，组合和结果指标这一事实时。考虑到几乎无限的组合，在将来进行临床试验评估之前，必须采用多种筛选方法，基于合理的首要原则测试潜在疗法。方法论，例如使用转基因动物模型或杂种动物，可能被证明可用于评估“线粒体混合物”中目前使用的十几种化合物的许多潜在组合。

我们的结果表明，与安慰剂相比， 针对线粒体功能障碍的三种后果的CrM，CoQ 10和硫辛酸的联合疗法可改善静息血浆乳酸浓度，身体成分，踝背屈强度和氧化应激。 但是，由于一个患者组比其他患者具有更大的获益 （MELAS> CPEO / KSS =其他） ，因此一种治疗策略可能并不普遍适用于所有线粒体疾病。

这项研究由沃伦·拉默特（Warren Lammert）及其家人慷慨捐赠。辅助酶Q 10和硫辛酸由Tishcon捐赠，肌酸一水合物由Avicena捐赠。

8-IsoP，8-异前列腺素; 8-OHdG，8-羟基-2'-脱氧鸟苷; ％BF，身体脂肪百分比；辅酶Q 10，辅酶Q 10 ; CPEO，慢性进行性眼外肌麻痹；CrM，肌酸一水合物；ETC，电子传输链；FFM，无脂肪物质；HPLC高效液相色谱；KSS，Kearns–Sayre综合征；MELAS，线粒体脑病，乳酸性酸中毒和中风样发作；mtDNA，线粒体DNA；PCr，磷酸肌酸；ROS，活性氧；TBW，全身水

略